大豆甙元对高胆固醇血症人群的干预效应研究
大豆甙元是大豆异黄酮(soy isoflavones，SI)的主要种类之一，其在某些人群的肠道内，可以在微生物的作用下代谢生成雌马酚。由于个体肠道菌群的差异，并不是所有人都可以将大豆甙元代谢为雌马酚。能够将大豆甙元代谢为雌马酚的人群称为雌马酚代谢阳性者(equol producer, EP+)，反之则称为雌马酚代谢阴性者(equolnon-producer，EP-)。有观点认为，SI可能在EP+人群会产生优于EP-人群的健康效应。以往研究往往采用SI提取物来评估雌马酚代谢表型对SI健康效应的影响。而另外一种主要存在的SI成分——染料木黄酮，可能会混淆雌马酚代谢表型对SI健康效应的影响。染料木黄酮并不能在人体内代谢产生雌马酚。然而，单独的染料木黄酮干预可以明显改善围绝经期综合症和绝经后骨质疏松，以及促进心血管系统健康。因此，无论是在EP+人群或者EP-人群，以染料木黄酮为主的SI提取物的健康效应可能主要依赖于染料木黄酮。因此，以往研究对于雌马酚代谢表型与SI健康效应的关系的评估的临床依据还存在不足。 大量流行病学研究表明，血液中甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇(low densitylipoprotein cholesterol，LDL-C)浓度升高，高密度脂蛋白胆固醇(high densitylipoprotein cholesterol，HDL-C)浓度降低是心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)的重要危险因素。近十年来，多项系统评价和Meta分析评估了SI对血脂水平的影响，但结论却并不一致。多数Meta分析表明含SI的大豆分离蛋白具有降低血总胆固醇和LDL-C的作用，而也有Meta分析表明单纯的SI干预对于血脂没有影响。SI对血脂的影响存在争议的原因除了在于各研究所采用的SI干预的种类、形式、剂量及时间不同之外，也可能在于雌马酚代谢表型的影响。此外，近年来的研究发现，尿酸也是CVD的独立危险因素，降低尿酸水平可能有助于防治CVD。在我国人群中，EP+人群的血清尿酸水平相比EP-人群较低。 为了明确雌马酚代谢表型与SI健康效应的关系，应当采用大豆甙元作为SI的唯一来源进行临床干预试验。本研究以高胆固醇血症人群为受试者，采用大豆甙元干预半年，观察大豆甙元对CVD危险因素的影响，并深入探讨雌马酚代谢表型与大豆甙元健康效应的关系。 研究对象与方法 (1)本临床研究中的受试者为轻度和中度的高胆固醇血症患者，诊断标准为:空腹血清总胆固醇≥5.18 mmol/L(200mg/dl)且＜10.4mmol/L(400mg/dl)。要求年龄在45-65岁，重庆市常住居民。 (2)采用随机双盲对照试验设计。210名受试者（108名男性和102名女性）随机分配到大豆分离蛋白（5g/天）不添加大豆甙元组（安慰剂组），或添加40mg大豆甙元组（DAI40组），或80mg大豆甙元组（DAI80组）。干预时间为6个月。该研究由第三军医大学伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。所有试验程序都符合赫尔辛基宣言的规定。这项试验在中国临床试验网上注册，注册号为CHICTR-TRC-10001048。 (3)所有受试者完成3份问卷调查，包括个人基本信息、健康状况和生活方式调查表，食物频数表和3天24小时膳食记录表。 (4)在试验开始前，受试者连续3天每天进食150克豆腐，然后收集第4天晨尿样本。用酶降解法从尿液中提取SI及大豆甙元代谢产物，高压液相色谱法检测SI及大豆甙元代谢产物。尿液中雌马酚的浓度高于0.242mg/L（1000 nmol/L）且雌马酚:大豆甙元的比值进行log10转化后的数值高于-1.75者可以判定为EP+，否则为EP-。 (5)血清总胆固醇和甘油三酯采用过氧化物酶法测定，血清LDL-C和HDL-C采用清除法检测。血清载脂蛋白AⅠ和B采用免疫透射比浊法测定，血清脂蛋白(a)采用免疫比浊法测定。血糖采用葡萄糖氧化酶法测定，血清尿酸浓度用直接酶法测定。血清胰岛素用电化学发光免疫法测定。全血糖化血红蛋白用高压液相亲和层析技术法检测。 (6)所有的统计分析采用SPSS for Windows软件。性别和雌马酚代谢表型等计数资料在各组间的差异采用x2检验。在试验开始和结束时，3组间计量资料的差异采用单因素方差分析评价。以干预后改变的差值作为因变量，试验前的数据作为协变量，采用单因素协方差分析评估大豆甙元干预对心血管危险因素的影响，多重比较采用Bonferroni方法进行。数据分别按性别和雌马酚代谢表型分层后，进行统计分析。此外，由于分层后样本量减少，DAI40组和DAI80组的数据合并后也进行统计分析。采用双侧检验，α水平设定为0.05。 研究结果 (1)177名受试者（91名男性和86名女性）完成了试验。本研究过程中受试者的依从性良好。除DAI80组有1名绝经后妇女在干预后再次来月经，所有受试者均无任何严重不良反应。三组间在年龄分布、性别构成和雌马酚代谢表型等方面均无明显差别。 (2)干预前后，三组受试者的日均膳食能量、蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质摄入水平无明显差异。由于受试者在研究过程中避免大豆及豆制品的摄入，因此大豆蛋白和异黄酮的摄入量明显减少。 (3)大豆甙元干预6个月可明显降低高胆固醇血症人群的血清甘油三酯浓度，但不存在剂量-效应关系。干预6个月时，相比安慰剂组，DAI40组和DAI80组受试者的血清甘油三酯浓度分别降低了0.15±0.62和0.24±0.61 mmol/L(P=0.044和0.031)。然而， DAI40组和DAI80组受试者的血清甘油三酯浓度及改变值均没有明显差异。在高甘油三酯血症（血清甘油三酯浓度高于1.71 mmol/L）人群，相比安慰剂组，血清甘油三酯浓度在DAI40组和DAI80组显著下降了0.62±0.71 mmol/L(n=27)和0.69±0.71 mmol/L(n=21)。 (4)相比安慰剂组，DAI80组受试者在干预6个月后的血清尿酸浓度明显降低(P=0.041)。然而，DAI40组与安慰剂组相比，以及DAI40组和DAI80组相比均没有发现血清尿酸浓度的改变存在显著差异。大豆甙元干预降低血清尿酸浓度的作用不存在剂量-效应关系。 (5)大豆甙元干预不影响血清总胆固醇、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白AⅠ和B、脂蛋白(a)、血糖、胰岛素和全血糖化血红蛋白浓度。 (6)女性EP+者的比例明显高于男性。雌马酚代谢表型对大豆甙元干预降低血清甘油三酯和尿酸浓度的作用不明显。而大豆甙元干预可使部分个体的雌马酚代谢表型发生转变。 结论 (1)每天40mg或80mg的大豆甙元干预半年可以明显降低高胆固醇血症人群血清甘油三酯和尿酸浓度，不存在剂量-效应关系。同时对其他血脂、血糖和胰岛素等未发现有显著影响。 (2)雌马酚代谢表型不影响大豆甙元的干预效果。而大豆甙元干预可使部分个体的雌马酚代谢表型发生转变。
大豆甙元;高胆固醇血症;危险因素;干预效应研
第三军医大学
硕士
营养与食品卫生学
糜漫天
2014
中文
R552
90
2015-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）