维生素C在Cr（Ⅵ）诱导肝细胞线粒体损伤中的时序效应
目的：
在体外实验系统中，探讨不同浓度维生素C(VitC)处理浓度在六价铬(Cr(Ⅵ))引起L-02肝细胞线粒体损伤中的时序效应。
方法：
Cr(VI)用重铬酸钾(K<,2>Cr<,2>O<,7>)配制。将6.25、25、100、400、1600μmol／L VitC和2.5、10、40、160、6401μmol／L Cr(VI)分别加入L-02肝细胞的培养基中，处理24小时，用MTT法测定细胞存活率，通过回归方程求出VitC和Cr(Ⅵ)的抑制细胞生长半数抑制浓度(IC<,50>)，以此确定后续试验毒作用浓度。
分别将不同毒性比的VitC和Cr(VI)按照不同先后次序作用于L-02肝细胞，培养24小时，用MTT比色法检测细胞存活率；化学比色法测定线粒体内谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和线粒体膜通透性；偏振分光光度法测定细胞膜流动性；荧光分光光度法测定线粒体膜电位等。
结果：
1．VitC和Cr(VI)的回归方程分别为：Y=-36.001+33.638X，Y=5.007+28.576X。VitC与Cr(VI)对肝细胞增殖的半数抑制浓度(IC<,50>)分别为354.21μmol／L和35.65μmol／L。VitC与Cr(VI)的细胞增殖抑制毒性比约为1：10。
2．VitC对Cr(VI)所致肝细胞线粒体抗氧化系统损伤的影响：当Cr(VI)与VitC毒性比为4：1时，先Cr(VI)后VitC处理组的MDA含量显著高于其他两个不同处理时序组(P<0.05)；当二者毒性比为1：1时，先Cr(VI)后VitC处理组GSH显著低于其他两个不同处理时序组，MDA含量显著高于其他两个不同处理时序组(P<0.05)；Cr(Ⅵ)和VitC同时试验组的SOD活性显著高于其他两个不同处理时序组(P<0.05)；当毒性比为1：4时，3个不同处理时序组的GSH、MDA结果两两之间均有显著性差异(P<0.05)；Cr(VI)和VitCN时试验组的SOD活性显著高于先Cr(VI)后VitC处理组(P<0.05)。
3．VitC对Cr(VI)所致细胞线粒体膜通透性改变的影响：三个不同Cr(VI)与VitC毒性比处理组中，先Cr(VI)后VitC处理组线粒体膜通透性最大。
4.VitC对Cr(Ⅵ)所致细胞线粒体膜电位改变的影响：三个不同Cr(Ⅵ)与VitC毒性比处理组，当Cr(Ⅵ)与VitC毒性比为4:1和1:1时，3个不同处理时序组的线粒体膜电位结果两两之间均有显著性差异(P<0.05)；当毒性比为1:4时，先Cr(Ⅵ)后VitC处理组线粒体膜电位显著低于其他两个不同处理时序组相比(P<0.05)。
5.VitC对Cr(Ⅵ)所致细胞线粒体膜流动性改变的影响：膜流动性未观察到明显变化。
结论：
1.VitC对Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞线粒体损伤的拮抗作用依次为：Cr(Ⅵ)与VitC同时试验组>先VitC处理后Cr(Ⅵ)染毒组>先Cr(Ⅵ)染毒后VitC处理组。
2.当Cr(Ⅵ)为36μmol／L浓度时，VitC与Cr(Ⅵ)无论何种处理时序，高浓度VitC(14401μmol／L)可对L-02肝细胞线粒体造成一定损伤。
3.不同VitC与Cr(Ⅵ)毒性比对VitC拮抗Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞线粒体损伤的作用的影响无明显规律。
Cr(Ⅵ);维生素C;时序效应;L-02肝细胞;线粒体损伤
中南大学
硕士
卫生毒理学
钟才高
2006
中文
R977.23;R329.2
49
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）