维生素A、E对人血清培养食管癌细胞Eca-109增殖活性的影响
目的：
研究维生素A、E对人血清培养人食管癌细胞Eca-109增殖活性的影响，并探讨其作用机制。
方法：
1．用灭活和非灭活人血清(3％、5％、10％、15％)，培养人食管癌细胞Eca-109，通过MTT比色法、细胞倍增时间和细胞克隆形成率的计算，观察血清是否灭活和不同血清浓度对细胞增殖的影响。
2．在含5％未灭活人血清的培养液中加入不同浓度的维生素A，通过MTT比色法、细胞毒性实验、<'3>H-TdR掺入实验、细胞流式术检测方法观察维生素A对细胞增殖活性的影响。
3．在含5％未灭活人血清的培养液中加入不同浓度的维生素E，通过细胞生长曲线和细胞毒性实验观察维生素E对细胞增殖活性的影响。
4．在含5％未灭活人血清的培养液中加入不同浓度的维生素A和E，用细胞生长曲线观察维生素A和E对细胞增殖活性的协同效应。
5．用食管癌患者血清培养人食管癌细胞Eta-109，通过细胞生长曲线、倍增时间和<'3>H-TdR掺入实验，观察其对细胞增殖的影响。
结果：
1．从MTT比色法、细胞倍增时间和克隆形成率的结果来看，未灭活人血清浓度为5％细胞生长较好，灭活人血清最佳浓度是10％。浓度为15％时不论灭活与否细胞生长均受抑制。任何条件下，人血清组细胞生长均好于小牛血清组。
2．从MTT比色法、细胞毒性实验、<'3>H-TdR掺入实验以及细胞流式术结果可见，维生素A能抑制人食管癌细胞Eca-109的增殖，影响细胞DNA的合成，阻止细胞进入有丝分裂状态。
3．从MTT比色法、细胞毒性实验的结果可见，维生素E对人食管癌细胞Eca-109的增殖无明显的抑制作用。
4．从细胞生长曲线可见，维生素A、E对人食管癌细胞Eca-109的增殖没有协同作用。维生素E并没有增强或减弱维生素A的作用效果。
5．从细胞生长曲线、倍增时间和<'3>H-TdR掺入实验结果可见，放化疗后有效的食管癌患者血清对细胞生长有一定抑制作用。新发食管癌患者血清浓度在5％、10％、15％均能适应人食管癌细胞Eca-109生长的要求，而盐亭和成都地区正常人血清浓度只在5％时能满足要求，过高则抑制生长。
结论：
1．用人血清可代替小牛血清培养人食管癌细胞Eca-109，培养时选择5％未灭活人血清较合适。
2．维生素A能抑制人食管癌细胞Eca-109的增殖，存在剂量—反应关系。其机制可能为维生素A使细胞积聚于S期，破坏其DNA合成，使其不能通过G<，2>/M调控点，抑制细胞增殖。
3．维生素B对人食管癌细胞Eca-109的增殖无明显的抑制作用，其原因可能与维生素E的浓度和抑癌方式有关。
4．维生素A、E对人食管癌细胞Eca-109的增殖没有协同作用。可能是两种维生素的抑癌机制和作用顺序不同以及维生素A作用强掩盖了二者的协同效应。
5．食管癌患者血清比正常人血清更有利于人食管癌细胞Eca-109的生长。因此可考虑将此技术用来反映肿瘤病人临床治疗的效果。
食管肿瘤;癌细胞;血清;维生素A;维生素E;增殖活性
四川大学
硕士
营养与食品卫生学
黄承钰
2006
中文
R735.1
79
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）