三株蓝细菌菌株胞外多糖研究和菌种鉴定
三株从海水中分离的蓝细菌菌株A104、A109、A115在其生长过程中可以向周围培养基中分泌大量粘性多糖类物质，采用单次单因子方法对培养基组成(不同NaCl浓度、不同MgS04浓度)和培养条件(温度、光照强度)进行优化研究，最终得到这三株菌生产胞外多糖类物质的最佳培养基成分和最佳培养条件：A104：60gL<'-1>NaCl，0.6gL<'-1>MgSO4，A109：40gL<'-1>NaCI，0.7gL<'-1>MgSO4，Al15：30gl<'-1>NaCL,0.8gL<'-1>MgSO4.最适培养条件：均为28℃，光照强度分别为3600，2700，3600 Lux。A104、A109、A115胞外多糖产量在上述条件下分别在第12天，9天和1l天达到8.57 gL<'-1>，7.53 gL<'-1>和6.98gl<'-1>。
因为这三株菌所产胞外多糖均为水溶性多糖，因此采用了乙醇沉淀的方法从培养物上清中沉淀出多糖类物质，并使用Sevag方法去除多糖沉淀中的蛋白质，使用紫外扫描方法检测蛋白质是否除尽，除净蛋白质的多糖粗品使用透析方法去除小分子杂质，通过分子筛层析(SeptldexG-100，SeptldexG-75)方法进一步纯化，发现这三株菌所产胞外多糖为分子量均一的单一多糖。通过分子筛层析(Sepharose 4B)测定它们的分子量分别为：25kD，38kD和46kD。通过硫酸基团含量测定，糖醛酸含量测定，未发现这三种胞外多糖中有这两种基团存在。通过薄层层析(TLc)分析它们的单糖组成，三种多糖均只含有葡萄糖一种单糖组分。
采用形态观察和16SrRNA基因序列分析相结合的方法对这三株菌进行了菌种鉴定，发现，从形态学角度出发，这三株菌的形态、大小、分裂方式与伯杰氏手册中对Cyanothece的形态描述一致。从16SrRNA基因序列分析方法出发，这三株菌的16SrRNA基因序列与列与Dactylococcopsis标准菌株Dacfylococcopsissp．PCCC8305的16SrRNA基因序列相似度分别达到：99％、99％、98％。因此，这三株菌究竟属于哪个属还需要其他鉴定方法的辅助分析来进一步判断。
蓝细菌;胞外多糖;菌种鉴定
中国海洋大学
硕士
海洋生物学
池振明
2006
中文
Q938.8;Q93-331
66
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）