采用mRNA差异显示技术分离家蝇幼虫免疫相关基因的研究
昆虫虽然没有像高等生物那样的特异性免疫系统，但在受到病原体感染后，体内能产生多方面的生理生化反应，抑制或杀死病原体。家蝇(Muscadomestica)在昆虫中占有极其重要的地位，表现出极强的适应恶劣环境的能力，对其免疫防御系统的研究具有非常重要的理论意义和实际应用价值。
本文采用mRNA差异显示PCR技术，对比了家蝇幼虫在受到大肠杆菌(Escherichiacoli)感染后，基因表达发生的变化。通过对差异片段的回收，克隆测序，Northern点杂交验证，最终确定了10个诱导后差异表达的真阳性cDNA片段，其长度为140-824bp不等。经GenBank同源性分析发现，这10个片段的氨基酸翻译序列分别与不同物种的不同氨基酸序列有较高的同源性。YG20-600翻译的氨基酸序列与意大利蜜蜂的酚氧化酶原激活因子有36％的同源性(E值为4e-22)；YG5-370翻译的氨基酸序列与棕尾别麻蝇的前脂肪体蛋白有高达92％的同源性(E值为4e-54)；YA24-190翻译的氨基酸序列与家蚕的胰凝乳蛋白酶抑制剂有65％的同源性(E值为2e-08)。其它片段也分别与相应物种的幼虫表皮蛋白、组织蛋白酶、真核细胞翻译起始因子、溶菌酶、NADH脱氢酶亚单位、Attacin抗菌肽等有较高的同源性。这些基因都直接或间接地参与了家蝇幼虫免疫调节的生理过程。其中有些基因是近年来刚刚被发现并起步研究的，其结构特征和作用机理还不明确。本文分离出的差异显示片段为家蝇乃至整个昆虫纲的免疫防御系统的研究提供了参考数据。
PCR技术;mRNA差异显示技术;免疫防御;基因表达改变
南开大学
硕士
遗传学
杜荣骞
2006
中文
Q342.4
96
2007-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）