pf40基因在玉米中的遗传转化
高等植物的分枝研究一直是植物界研究植物发育的热点。伴随着与分枝相关的突变体的获得和分子生物学技术的应用,高等植物分枝的研究进展很快。对禾本科作物来说,它们的分枝,即所谓的分蘖,具有一定的特殊性。
pf40基因是来源于谷子未成熟种子cDNA文库,它或其同源基因普遍存在于禾本科植物中。初步研究显示pf40基因有促进分枝(分蘖)的功能。因此本项研究的主要目的是通过转基因技术,将来源于谷子的pf40基因转入到玉米中,通过观察玉米的分枝(分蘖)表型的改变,初步探讨玉米中的pf40基因或其同源基因的功能,为今后的进一步研究奠定基础。
我们将pf40基因正义表达载体和RNAi载体通过基因枪法导入常规玉米Z3、Z31、Q31的杂交组合愈伤组织,通过一系列的分子检测,不同载体获得了不同的转化效率,其中正义表达载体的转化效率是7.81%,RNAi载体的转化效率为14.6%。
通过对T1、T2代再生植株的分子检测,共得到T2代Southern杂交阳性的转基因玉米植株10株,其中转正义载体的植株为4株,分属于4个不同的株系(T1代);转RNAi载体的植株为6株,分属于4个不同的株系(T1代)。说明外源pf40基因已经整合到玉米基因组中,并能稳定地遗传到下一代,经RNA点杂交分析,外源pf40基因己在玉米中得到表达。
通过对转pf40基因玉米茎基部的分蘖表型和雄穗的分枝表型的观察发现,无论是转正义表达载体的转基因植株还是RNAi载体的转基因植株与未转基因植株均无明显差异。玉米中的pf40基因或其同源基因的确切功能,尚待进一步研究。
pf40基因;玉米;转基因植株;分枝;遗传转化
中国农业大学
硕士
遗传学
朱登云
2006
中文
S513.03;S334
49
2007-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)