影响绵羊体外胚胎生产效果因素的研究
本论文从卵母细胞采集、体外成熟培养、体外受精、胚胎体外发育培养以及卵母细胞冷冻保存方面研究了影响绵羊体外胚胎生产效果的因素，以期提高绵羊体外胚胎生产的效率。
在卵母细胞采集方面，研究了不同采集方法(抽吸法和切剖法)和不同季节对绵羊卵母细胞采集效果的影响。结果表明，平均每个卵巢获得的可用卵数，切剖法显著高于抽吸法(2.02枚vs1.05枚，P＜0.05)；9、10月份屠宰绵羊平均每个卵巢所采集的卵母细胞数(1.50枚，1.68枚)极显著高于其它月份(1、2、3、4、5、6、10、11、12月份)(P＜0.01)。
在卵母细胞体外成熟培养方面，比较了成熟液中添加FBS和ESS对卵母细胞成熟效果的影响。结果表明：成熟液中添加ESS较FBS能显著提高卵母细胞的成熟率(72.7﹪vs60.2﹪，P＜0.05)。
在体外受精方面，研究了精卵共孵育时间长短和不同精液处理方法对体外受精卵裂率的影响。结果表明：精卵共孵育24h组卵裂率高于6h组(60.4﹪vs22.7﹪，P＜0.05)，而与18h组差异不显著(60.4﹪vs58.6﹪，P＞0.05)；低温保存精液上游法的卵裂率(78.6﹪)显著高于低温保存精液Percoll离心法和冻精Percoll离心法(60.2﹪，62.3﹪)(P＜0.05)，极显著高于冻精上游法(21.1﹪)(P＜0.01)。
在体外胚胎发育培养方面，研究了在发育液中添加EDTA、葡萄糖以及发育液不同更换方式对体外胚胎发育的影响。结果表明，胚胎发育培养液中添加10μMEDTA能显著提高卵裂率(55.7﹪vs43.6﹪，P＜0.05)和桑椹胚率(24.6﹪vs16.1﹪，P＜0.05)；在胚胎发育不同阶段添加变化浓度的葡萄糖可显著提高卵裂率(66.1﹪vs44.7﹪，P＜0.01)和桑椹胚率(33.7﹪vs17.1﹪，P＜0.05)；半量更换发育液方式的桑椹胚率高于全换液和不换液方式(42.0﹪vs33.3﹪and16.2﹪，P＜0.05)。
本论文还研究了在培养液(包括成熟液、受精液和发育液)中分别添加0，1，2，5和10ng/ml的VEGF对绵羊体外胚胎生产效率的影响。结果表明：VEGF添加量为5ng/ml和2ng/ml的组卵裂率(86﹪，69﹪)和桑椹胚率(31.0﹪，25.0﹪)显著高于其它各组(P＜0.05)。
在绵羊卵母细胞冷冻保存方面，研究了利用EDFS30玻璃化冷冻液，采用OPS法玻璃化冷冻体外成熟绵羊卵母细胞效果的研究。结果表明：经冷冻保存的卵母细胞解冻后体外受精和孤雌激活的卵裂率、桑椹胚率(42.3﹪、50.0﹪和18.4﹪、33.4﹪)显著低于非冷冻组(65.3﹪、68.2﹪和27.0﹪、13.4﹪)(P＜0.05)，冷冻组没有胚胎发育到囊胚。
绵羊;体外胚胎繁殖;OPS法玻璃化冷冻;精液处理;体外受精
河北农业大学
硕士
动物遗传育种与繁殖
田树军
2006
中文
S826;S814.6
40
2007-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）