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DOI:10.7666/d.y933443

海岛棉抗黄萎病基因分子标记研究

甄瑞
河北农业大学
引用
本研究利用海岛棉与陆地棉种间配制的杂交组合,对海岛棉黄萎病抗性鉴定、分子标记和与抗性相关的分子标记的克隆等内容进行了深入的研究。其目的在于:找到与黄萎病抗性基因连锁的分子标记并克隆该标记,为最终克隆棉花黄萎病抗性基因及分子标记辅助育种奠定基础。本研究主要结果如下: 1.陆地棉感病品种中棉所8号×海岛棉抗病品种Pima90-53组合的F2及F2:3家系的中等致病力的黄萎病菌系抗性鉴定结果表明,F2群体中的单株及通过F2:3家系鉴定所对应的F2单株中,抗病单株:感病单株的比例符合3:1的卡方适合性测验。 2.用768对SSR引物对中棉所8号×Pima90-53组合含有182个单株的F2群体的抗、感基因池进行扩增,在这些引物中BNL3255和BNL2440引物在该组合的抗、感基因池之间表现多态性,且这两对引物在该组合亲本的相应位置上也存在多态性。其中,BNL3255在抗、感基因池间扩增出一条大小为208bp的多态性片断,定名为BNL3255-208。利用这两对引物对该组合F2单株进行SSR扩增,并利用MAPMAKER/EXP(VERSION3.0b)软件对扩增结果进行分析,结果表明,BNL3255-208标记与黄萎病抗性基因连锁,且它们之间的遗传距离为13.7cM,BNL2440扩增出的多态性标记与黄萎病抗性基因之间不连锁。用356对AFLP引物对该组合的F2抗、感基因池进行扩增,结果表明在该组合的抗、感基因池之间未能找到差异引物。 4.用中棉所8号×Pima90-53组合含有215个单株及含有100个单株的两个F2群体进行BNL3255-208标记的应用性验证,结果表明分别有71.75﹪和88.61﹪的抗病单株上存在该标记,该标记可以作为分子标记辅助选择的一种验证手段在育种实践中加以应用。 5.通过基因工程的手段将与抗病相关的差异带BNL3255-208回收,并进行连接、转化、克隆、测序,结果表明该差异带是一条长211bp的、含10次TG重复的片段。通过测序,该片段可以为细菌人工染色体(BAC)文库的筛选以及进一步分离、克隆海岛棉抗黄萎病基因奠定基础。

海岛棉;黄萎病;基因分子标记

河北农业大学

硕士

作物遗传育种

马峙英;王省芬

2006

中文

S562;Q943.2

41

2007-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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