转CED-9基因植物的耐铝抗盐性遗传分析
CED-9是从动物线虫(C.elegance)中克隆出来的抗凋亡基因，属于Bcl-2家族，与哺乳动物中的抗凋亡基因Bcl-2同源。本文将CED-9基因通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)EHA105介导转化烟草和拟南芥，并研究CED-9基因在植物抗逆境中的功能，获得以下结果：
1.将CED-9小片段连接到中间载体pBS上以获得合适的酶切位点，将酶切下来的CED-9小片段连接到诱导型表达载体pER8上，成功构建了诱导型表达载体pER8-ced9；通过农杆菌EHA105介导，用真空浸润法转到拟南芥中，用潮霉素对转基因种子筛选获得抗性植株。
2.从质粒pBS中获取CED-9基因片段，构建中间载体pGEM-ced9以获得合适的酶切位点。在此基础上再构建重组表达载体pBI-ced9，通过农杆菌EHA105介导，将CED-9基因导入烟草叶片组织中，筛选得到再生植株，经PCR和Southern点杂交检测显示，目的基因确已整合到烟草基因组中。
3.转基因烟草植株后代遗传分析，表明其中4个株系的转基因后代小苗Kan抗性呈3∶1的分离比，并用RT-PCR检测到2个株系的烟草后代有CED-9基因的表达。
4.通过与野生型烟草对照，研究了CED-9基因在烟草的抗逆境中的功能，结果显示CED-9基因能提高烟草对金属Al和盐的抗性，并对烟草的生长发育产生一定的影响。
细胞凋亡;CED-9基因;转基因烟草;农杆菌介导转化;盐胁迫;铝胁迫
浙江大学
硕士
遗传学
朱睦元
2006
中文
Q94-3
63
2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）