FHIT蛋白在直肠癌组织芯片中表达及与细胞凋亡相关性研究
背景：FHIT基因是新的抑癌基因，参与多种肿瘤的发生、发展；其抑癌机制可能与细胞凋亡有关。
研究目的：1.分析FHIT蛋白在直肠癌各组织中的表达以及直肠癌中FHIT蛋白表达与其病理、临床特征的关系，探讨FHIT基因在直肠癌发生、发展中的作用及意义；2.研究直肠癌中的FHIT蛋白表达与凋亡相关基因蛋白Bax、Bcl-2、Survivin表达及细胞凋亡指数间的关系，探索FHIT基因和直肠癌细胞凋亡的相关性。
方法：选取病理证实存档组织腊块(包括正常直肠组织、腺瘤组织各16例，直肠癌组织80例)，按正常、腺瘤、高分化、中分化、中分化、低分化、转移癌顺序制作7x8点阵组织芯片两块。分别采用FHIT、Bax、Bcl-2、Survivin抗体和免疫组化SP法检测正常、腺瘤及直肠癌组织中的蛋白表达，分析各组间FHIT蛋白失活率并分别比较直肠癌FHIT表达阳性和阴性组中Bax、Bcl-2、Survivin蛋白表达情况；Tunel法行原位细胞凋亡检测，计算凋亡指数，比较其与FHIT蛋白表达间的关系。
结果；FHIT抗体在细胞浆中表达，基本上集中表达在肿瘤细胞或者正常直肠上皮细胞，间质少见表达，在正常组织、腺瘤及癌中表达率分别为：93.75％(15/16)、75.00％(12/16)、46.25％(37/80)；直肠癌组织FHIT基因表达明显减少或缺乏。良性直肠组织FHIT基因异常表达率为15.63％(5/32)，直肠癌组织异常表达率为53.75％(43/80)，二者比较，差异有极显著性(x2=13.57，P=0.000)(表1).其表达下降与年龄、性别、组织学类型无关，和分化程度、淋巴结转移、Duke，s分级及5年生存率关系密切(P＜0.05)。
BCL-2抗体在直肠肿瘤及正常组织中定位于细胞膜或细胞浆，表达细胞除直肠肿瘤细胞以外，同时有间质淋巴细胞的表达，正常组织、腺瘤及癌中表达率分别为：31.25％(5/16)、43.75％(7/16)、51.25％(41/80)；BAX抗体为细胞浆或间质表达，多数表达位于直肠肿瘤组织及正常组织的细胞浆，少数见于间质细胞，背景比较干净，在正常直肠组织、腺瘤和直肠癌中的表达分别为：56.25％(9/16)、50.00％(8/16)、72.50％(58/80)；Survivin抗体表达主要在直肠肿瘤细胞浆表达，为散在阳性表达模式，在正常直肠组织、腺瘤和直肠癌中的表达分别为：6.25％(1/16)、12.25％(2/16)、77.50％(62/80)。FHIT蛋白和bcl-2(x2=12.76，P=0.000)、bax(x2=6.75，P=0.009)和survivin(x2=3.89，P=0.048)表达关系密切，其表达下降与bcl-2上调、bax下调及survivin表达上升趋势相符。
凋亡细胞表现为胞核内出现棕黄色颗粒，直肠癌FHIT基因表达程度各级间两两比较除(-)及(+/-)外(P=0.09)，余者均P＜0.01，差异有显著性(F=67.94，P=0.000)。
结论：1.FHIT蛋白在直肠癌中异常表达是大概率事件，FHIT基因可能参与了直肠癌的发生、发展；其异常表达与直肠癌的临床病理参数关系密切，有希望作为评估直肠癌高危因素及生物学行为的重要参考指标。
2.研究发现直肠癌中FHIT蛋白表达与凋亡相关基因蛋白Bax、Bcl-2、Survivin表达以及原位凋亡细胞检测结果密切相关，提示其可能通过凋亡环节抑制直肠癌细胞增殖。
直肠癌;FHIT蛋白;细胞凋亡;组织芯片;凋亡指数
广州医科大学;广州医学院
硕士
外科学
曹杰;唐伟镖
2006
中文
R657.1;R735.37
52
2006-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）