鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌中的表达纯化及药理活性研究
本研究采用含有内蛋白子(Intein)的表达系统，在Intein剪切过程中，加入提供NH3的试剂达到酰胺化的目的。
本文利用半化学半酶促法获得大肠杆菌密码子偏嗜的sCT基因，将sCT基因克隆入含有Intein的大肠杆菌融合型表达载体pTWIN1中。重组表达载体转到大肠杆菌ER2566中，表达条件优化后，经发酵罐流加发酵，破菌，然后将表达的融合蛋白经CBD亲合柱纯化，并且在亲和柱上一步完成Intein介导的目的蛋白的剪切和C末端的酰胺化。获得的sCT进一步的分离纯化得到初级纯品，通过观察其对破骨细胞活动的抑制和大鼠降血钙试验来初步检测其生物活性，结果表明，大肠杆菌重组的sCT融合蛋白经inein介导的剪切和酰胺化后，具有与化学合成的sCT相同的理化特征，并具有显著的降低大鼠血钙的活性，如果进一步优化工艺有望用于工业化生产。
鲑鱼降钙素;内蛋白子;酰胺化;大肠杆菌;重组
湖南中医药大学(湖南省中医药研究院);湖南中医学院
硕士
中药学
田育望;陈守春
2005
中文
TQ464.7;R285.5;Q78
52
2006-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）