人白介素-18的基因克隆、原核表达及其生物学活性的研究
为能将rhIL-18开发成基因工程药物并进一步研究其生物学活性及与疾病发生的关系进行了本实验。
本实验采用RT-PCR从正常人外周血白细胞中获得人白介素-18(hIL-18)成熟肽的cDNA,经EcoRI、BamHI双酶切后克隆入表达载体PBV220，并经测序鉴定；再转化至不同菌株的大肠杆菌中进行表达，并摸索不同大肠杆菌菌株、不同诱导时间对表达效率的影响；其包涵体经初步纯化后，采用微量细胞病变抑制法测定rhIL-18对于IFN-γ的诱生并采用MTT改进法测定其促进NK细胞杀伤活性的生物学活性。
本实验成功地克隆了白细胞介素-18基因并在大肠杆菌中获得表达，表达量在大肠杆菌菌型为DH5α，LB培养基42℃导5h时最高，其表达产物具有明显的诱导IFN-γ生成及促进NK细胞杀伤活性的作用，并呈剂量依赖性。
白细胞介素-18;RT-PCR;大肠杆菌;IFN-γ;NK细胞;其生物学活性
苏州大学医学院;苏州大学;苏州医学院
硕士
免疫学
杨吉成
2000
中文
R392.13
44
2005-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）