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采用基因芯片技术获取脑胶质瘤中差异表达的全长新基因及二条全长新基因的初步研究

祁震宇
苏州大学医学院;苏州大学;苏州医学院
引用
本实验利用含有4366条全长基因的cDNA微矩阵,来获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,有些是可能与胶质瘤的形成有一定的生物相关性的基因,而这些基因就通过这种方法获得的。其中两条全长新基因436F11和507E08又作进一步的研究工作。   本文第一部分采用基因芯片技术获取脑胶质瘤相关的差异表达的全长新基因。研究采用基因芯片技术获取脑胶质瘤相关的差异表达的全长新基因。从正常成人脑组织和脑胶质瘤中提取总RNA,然后利用oligotex亲合柱纯化获取mRNA。然后运用芯片点样仪将其点在玻璃片上。将3ug的人正常脑组织mRNA和胶质瘤mRNA合成cDNA后作为探针与基因芯片杂交。探针合成是用SuperscriptⅡ逆转录酶,以及Cy-5和Cy-3标记的dUTP,将mRNA逆转录成cDNA,杂交及随后的扫描,定量。 本文第二部分对二条脑胶质瘤相关的全长新基因的进行了初步研究。研究对其作了生物信息学分析.在NCBI数据库将两条序列进行了BLAST比较。然后,两条基因又做了Northernblot,原位杂交和染色体定位.Northernblot分析的目的是为了证实基因芯片的杂交结果,436F11在正常脑组织中高表达而在胶质瘤组织中低表达,而507E08则在胶质瘤组织中高表达而正常脑组织中低表达。

基因芯片;胶质瘤;差异表达;BLAST分析;辐射杂交技术

苏州大学医学院;苏州大学;苏州医学院

硕士

神经外科

惠国桢;谢毅

2000

中文

R739.41

117

2005-11-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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