LOX-1/PPARγ在ox-LDL诱导血管内皮细胞炎性分子表达中的作用
本研究的目的在于探讨LOX-1是否介导ox-LDL上调血管内皮细胞分泌粘附分子和趋化因子;再此基础上进一步探讨LOX-1/PPARγ信号途径在ox-LDL诱导血管内皮细胞粘附分子表达中的作用.研究方法:1、LOX-1与ox-LDL结合并介导对血管内皮细胞的损伤用胰酶灌注消化法分离并原代培养HUVECs,并从细胞的形态学、人第Ⅷ因子相关抗原以及透射电镜观察超微结构等方面对培养的细胞进行鉴定.2、Ox-LDL诱导血管内皮细胞表达LOX-1用n-LDL、polyinosonic acid、carrangeenan以及不同浓度的ox-LDL处理培养的HUVECs,用Realtime RT-PCR测定LOX-1 mRNA的表达水平,用Western blot测定LOX-1蛋白表达水平,观察ox-LDL对HUVECs表达LOX-1的影响以及LOX-1在ox-LDL诱导其自身表达中所起的作用.3、Ox-LDL通过LOX-1诱导血管内皮细胞趋化因子和粘附分子的表达用不同浓度ox-LDL培养HUVECs,用RT-PCR测定MCP-1、ICAM-1、VCAM-1以及E-selectin的mRNA表达;用Western blot测定MCP-1、ICAM-1、VCAM-1以及E-selectin蛋白的表达,观察ox-LDL对血管内皮细胞粘附分子和趋化因子表达的影响.4、PPARγ在ox-LDL通过LOX-1上调粘附分子表达中的作用用不同浓度ox-LDL处理培养的HUVECs;或HUVECs预先用polyinosonic acid和carrangeenan处理,再用ox-LDL培养,分别用Realtime RT-PCR和Western blot测定PPARγ的表达,观察ox-LDL对HUVECs PPARγ表达的影响.分别单独使用polyinosonic acid和1 5d-PGJ2、或联合使用polyinosonic acid和15d-PGJ2预先培养HUVECs,再用ox-LDL培养,分别用RT-PCR和Western blot测定ICAM-1、E-selectin以及LOX-1的mRNA和蛋白表达.探讨LOX-1/PPARγ途径在ox-LDL诱导粘附分子表达中的作用.
血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1;内皮细胞;过氧化物酶体增殖物激活受体-γ;粘附分子;氧化低密度脂蛋白;动脉粥样硬化;单核细胞趋化蛋白-1
中山大学
博士
卫生毒理学
凌文华
2004
中文
R543.502
103
2005-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）