功能荧光微球的制备及其对蛋白质的固定化
蛋白质的固定化,特别是高通量药物筛选中受体蛋白的固定化是目前生物医学领域的研究热点.固定化的载体材料特别是微球型载体的研究则是其中一个关键性的内容.采用改进的无皂乳液聚合法,制备了亚微米级到微米级的表面清洁化聚甲基丙烯酸甲酯微球.其方法是在无皂乳液聚合体系里分别加入乙醇、NaCl和甲苯.结果表明,在不同的反应条件下,体系表现出不同的聚合行为,同时加入乙醇、NaCl和甲苯,对反应最有利,可以制备出接近微米级的单分散聚合物微球.首次从产品收率与转化率的关系出发,考察了苯乙烯的分散聚合.结果表明,不同的分散介质对聚合过程、反应转化率、产品实际收率以及微球的平均粒径和粒径分布均有不同的影响.在此基础上,制备了1~10μm呈正态分布的聚合物微球.采用在苯乙烯分散聚合体系里加入功能单体的方法,制备了聚苯乙烯功能微球.采用吸附法,制备了聚苯乙烯功能化荧光微球.所制备的荧光微球的化学性能、物理性能、吸收及发射性能稳定,适合用做标记型蛋白质载体材料.分别考察了不同条件下,聚苯乙烯功能荧光微球对血清蛋白以及胰蛋白酶的固定化,对固定化胰蛋白酶的活性进行了研究.结果表明,在一定条件下,功能微球对血清蛋白及胰蛋白酶均具有相应的稳定吸附量.固定化酶在温度稳定性、pH值稳定性、储存稳定性以及回收活性方面具有游离酶不可比拟的优越性.从在载体表面位点占据度和蛋白质吸附的协同性出发,推导出蛋白质固定化的等温吸附公式,其结果为Y=K[P]<'φ>/K[P]<'φ>+1或lnK+φln[P]=ln(Y/1-Y).从熵变的原理出发,解释了蛋白质吸附中的一些基本问题.
功能荧光微球;无皂乳液聚合;分散聚合;蛋白质固定化;等温模型
中国科学院成都有机化学研究所
博士
有机化学
刘白玲
2004
中文
O632.13
114
2005-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）