蓝舌病毒HbC<,3>株对人和动物肿瘤细胞感染特性研究
该研究室在对蓝舌病毒中国湖北株-3(BTV-HbC<,3>)长期的研究过程中,注意到BTV-HbC<,3>可以在HeLa细胞,一种来自于人类宫颈癌的细胞,中良好地增殖,而后进一步发现其可以感染其他一些恶性肿瘤细胞.这个现象激发了我们对于一种新的癌症治疗方法的想象:肿瘤的病毒疗法.我们进行了几个实验,以探索BTV-HbC3是否具备成为一种溶癌病毒的潜能.分别以BTV-HbC<,3>感染几株细胞,包括人胚肺成纤维细胞HEL,人宫颈癌细胞系HeLa,人肺腺癌细胞系SPC-A-1,人星形胶质瘤细胞U251,小鼠星形胶质瘤细胞C6.这样,就能够观察BTV-HbC<,3>引起的细胞病变效应,以考察是否所有的受试细胞都对这种病毒敏感.在各株受试细胞上滴定BTV-HbC<,3>的组织培养半数感染量TCID<,50>,应用双向免疫扩散实验来检测是否所有感染BTV-HbC<,3>的受试细胞中都有BTV-HbC<,3>抗原出现等方法,考察了受试细胞中子代病毒的增殖能力,借以鉴别BTV-HbC<,3>对正常细胞和肿瘤细胞的感染性的差别.为了证实双向免疫扩散实验结果的可靠性,我们又应用逆转录聚合酶链反应RT-PCR来探测BTV-HbC<,3>在这些细胞中的复制状况,并借助透射电子显微镜,观察了受试细胞超微结构的形态学改变,清楚地了解BTV-HbC<,3>与细胞相互作用的形态学和形态发生学后果.试验结果表明:BTV-HbC<,3>能够导致除了人胚肺成纤维细胞之外的所有细胞发生细胞病变效应;在抗-BTV-HbC<,3>免疫血清和除了人胚肺成纤维细胞之外的所有细胞裂解液之间出现了抗原抗体复合物免疫沉淀线;逆转录聚合酶链反应检测到除了人胚肺成纤维细胞之外的所有受试细胞中的BTV-HbC<,3>特异性核酸序列.根据以上的结果,我们可以得到一个初步的结论,就是BTV-HbC<,3>不感染正常人胚肺成纤维细胞,但是它可以选择性地在肿瘤细胞中增殖并使之产生不同程度的细胞裂解效应或诱导细胞凋亡,最终杀死肿瘤细胞.这些细胞中,人肺腺癌细胞系SPC-A-1对BTV-HbC<,3>有最高的敏感性.实验显示BTV-HbC<,3>具有靶向性杀死某些肿瘤细胞的潜能.尽管其机制尚有待我们进一步深入研究,但这些资料为把BTV-HbC<,3>发展为一种可能的溶癌病毒提供了初步的实验室依据.
蓝舌病毒;人和动物;恶性肿瘤细胞;细胞感染;人胚肺成纤维细胞;逆转录聚合酶链反应;星形胶质瘤细胞;人肺腺癌细胞系;免疫扩散实验;细胞裂解液;细胞病变;聚合酶链反应检测;透射电子显微镜;抗原抗体复合物;增殖;诱导细胞凋亡;形态学改变;效应;细胞超微结构;宫颈癌细胞系
武汉大学
硕士
病原生物学
董长垣
2004
中文
R730.5
38
2005-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）