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北京化工大学学位论文原创性声明
第一章文献综述
1.1海藻糖的基本性质
1.2海藻糖的生理功能
1.3海藻糖的应用
1.4海藻糖的生物合成和制备
1.5海藻糖合成酶的分离纯化
1.6海藻糖合成酶的固定化
1.7本实验室采用酶法合成海藻糖
1.8本课题的研究意义
第二章实验材料及方法
2.1菌种和培养基
2.2实验方法
2.3分析方法
第三章细胞破碎条件优化
3.1细胞破碎方法
3.2超声波法
3.2.1超声波频率的影响
3.2.2超声波破碎时间的影响
3.3化学渗透法
3.3.1添加螯合剂(EDTA)
3.3.2表面活性剂
3.3.3甲苯破碎法
3.4多种方法复合破碎
3.4.1甲苯破碎与甲苯破碎联合超声破碎方法的比较
3.4.2破碎时添加EDTA的影响
3.4.3其他破碎方法
3.5小结
第四章海藻糖合成酶的初步纯化及酶保护剂的影响研究
4.1破碎液酶活分析
4.2固定化过程对细胞碎片酶活的影响
4.2.1思路的提出
4.2.2固定化过程对此双酶系统的优化影响
4.3酶保护剂对此双酶体系的影响
4.3.1载体壳聚糖的影响
4.3.2戊二醛单独影响
4.4小结
第五章MTSase和MTHase固定化过程
5.1固定化载体的选择
5.1.1.各种载体的制备
5.1.2各种载体固定化效果的比较
5.2 6201型担体固定化原理及实验步骤
5.2.1以6201型担体为载体固定化酶的反应原理
5.2.2实验步骤
5.3以6201型担体为载体固定化酶条件优化实验
5.3.1载体目数选择
5.3.2硅烷化时APTS浓度和pH值的影响
5.3.3戊二醛活化条件的影响
5.3.4固定化时酶交联条件的研究
5.3.5固定化酶活的酶活回收率
5.3.6固定化酶的pH效应
5.3.7固定化酶的温度效应
5.3.8底物浓度对海藻糖合成的影响
5.3.9残酶液反应结果分析
5.3.10最佳结果HPLC谱图分析
5.4 小结
第六章结论与建议
6.1主要结论
6.2问题与建议
参考文献
附录
致谢
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