毕赤酵母表达重组人胰激肽原酶
胰激肽原酶(pancreatic kallikrein,PK)作用于低分子量的激肽原释放出赖氨酰缓激肽(又名胰激肽原).激肽原酶和激肽系统(KKS)是维持血压平衡的一个重要组成部分,对血压、电解质平衡、炎症反应等生理或病理过程进行调控.因此,胰激肽原酶具有广泛的药用价值,除降血压之外,还可以用于治疗糖尿病肾病、改善肾脏功能,治疗心、脑血管疾病等.该文利用嗜甲醇毕赤酵母(Pichia pastoris)表达重组人胰激肽原酶(human pancreatic kallikrein,hPK).首先将hPKcDNA克隆至毕赤酵母穿梭表达质粒pPIC9K构建重组质粒pPIC9K/hPK,经BglⅡ线性化酶切,电穿孔将其整合到毕赤酵母GS115(His-Mut+)染色体上,利用MM、MD平板筛选His+Muts型阳性克隆,含不同浓度G418-YPD平板筛选高拷贝转化子.共筛选到27株阳性克隆,其中3株是高拷贝.
重组人胰激肽原酶;毕赤酵母;表达;纯化;酶活
北京化工大学
硕士
生物化工
陈劲春
2004
中文
Q556.3
63
2004-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）