血清蛋白的直接化学发光成像分析方法研究
该文建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳-化学发光成像技术检测血清蛋白的方法.主要研究了血清中的两种蛋白:结合珠蛋白(Haptoglobin,HP)和白蛋白(Human Serum Albumin, HSA),优化了电泳及化学发光成像的条件.利用该方法,可以成功地检测到不同类型的结合珠蛋白,并对其多态性进行研究.由于结合珠蛋白可以与含有Fe(Ⅱ)的血红蛋白(Hemoglobin,Hb)形成Hb-HP配合物,从而催化鲁米诺-过氧化氢发光体系,因此在实验过程中,可以用血红蛋白作为探针,将不同人的血清进行电泳分离,然后用化学发光成像法检测.同时还研究了Cu<'2+>、Zn<'2+>、Ni<'2+>、Mn<'2+>等不同金属离子对于此检测体系的增敏作用,发现这些离子对于该体系都有不同程度的增敏作用,而且Cu<'2+>对于蛋白谱带的位置影响也很大.我们还尝试了TiO<,2>纳米粒子、碳纳米管、聚苯乙烯纳米粒子对于血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳行为及化学发光成像行为的影响.由于白蛋白也可以与血红蛋白形成Hb-HSA配合物,而且此配合物对于鲁米诺-过氧化氢化学发光体系的催化作用远远强于血红蛋白本身,因此用该方法可以很灵敏地检测到白蛋白的存在,开辟了一条检测人血清白蛋白的新途径.我们还研究了金属离子与白蛋白形成的M<'n+>-HSA二元配合物及M<'n+>-HSA-Hb三元配合物对于鲁米诺-过氧化氢化学发光体系的催化作用,其中Co<'2+>增敏作用比较强;其他离子对于后者有增敏作用,对于前者增敏作用不明显.
化学发光成像;聚丙烯酰胺凝胶电泳;结合珠蛋白;白蛋白;血红蛋白;手性拆分;Prikle型手性固定相;美托洛尔;比索洛尔;高效液相色谱
北京师范大学
硕士
分析化学
欧阳津
2003
中文
O651
70
2004-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）