根癌农杆菌介导ubiC基因转化甘蓝的研究
为获得转ubiC基因甘蓝,对植物基因工程载体的构建、甘蓝的组织培养以及基因转化条件进行了研究.通过PCR方法从大肠杆菌基因组中扩增得到了ubiC基因,扩增产物克隆到pUC118载体,转化大肠杆菌JM109.提取质粒,连接重组到经相同酶切的Ti质粒pBI121上,构建了植物表达载体pBI121-ubiC,并将其转入根癌农杆菌LBA4404中.同时,采用甘蓝无菌苗的下胚轴为外植体,以MS为基本培养基,分别用直接分化再生系统和愈伤再生系统诱导不定芽的分化,建立了高效稳定的再生系统,不定芽分化频率达80﹪以上.利用根癌农杆菌介导将ubiC基因转入甘蓝,通过预培养、侵染、共培养、脱菌培养、筛选转化体等步骤,最后获得抗性愈伤组织.
ubiC基因;根癌农杆菌;抗性愈伤;甘蓝;大肠杆菌基因
南京理工大学
硕士
生物化工
杨树林;李大力
2002
中文
Q943.2
46
2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）