二化螟中肠Bt毒蛋白CrylAb受体基因的分子生物学研究
该论文以Bt 毒蛋白Cry1Ab 转基因水稻为材料,建立了从转基因植株中分离纯化外源基因表达产物 Cry1Ab 的二次高效液相离子色谱法;研究了处于有关缓冲溶液中的 Cry1Ab 蛋白构象性质及杀虫活性;以此为基础,用<'125>I标记二次色谱分离所得到的高纯度Cry1Ab蛋白,制得放射性探针;用该探针进行Western杂交实验证实了二化螟中肠存在Cry1Ab 受体蛋白;进一步用分子生物学有关方法克隆到二化螟中肠Cry1Ab 受体基因(Bt-R<,3>)cDNA全长序列,并在杆状病毒—昆虫系统中表达了Bt-R<,3>蛋白胞外结构域,Western点杂交实验显示表达产物能有效地结合Cry1Ab,从而确证所克隆到的Bt-R<,3>是Cry1Ab的受体基因;在这些研究的基础上,运用生物信息学手段分析了Bt-R<,3>蛋白的结构特性,Bt-R<,3>和文献已报导的几种Bt 受体蛋白之间的分子进化关系以及它们氨基酸序列间的保守性关系,从而更进一步地证实了Bt-R<,3>确实是Cry1Ab的受体基因.
CrylAb;转基因水稻;放射性探针;二化螟;受体基因;Bt-R<,3>
浙江大学
博士
生物物理学
陈子元;徐步进
2002
中文
S511
118
2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）