转mtlD基因旱稻和水稻的耐盐性以及遗传检测
该研究利用基因枪转化技术将来源于大肠杆菌的mtlD(1-磷酸甘露醇脱氢酶)基因导入旱稻和水稻中,以期通过基因工程手段提高植物的耐盐性.以旱稻成熟胚、水稻幼胚和成熟胚诱导的胚性愈伤为受体材料,确定旱稻筛选压力为50mg/L潮霉素B.试验表明,旱稻和水稻愈伤组织的继代时间对抗生愈伤的筛选频率无明显影响;基因枪轰击后愈伤组织的恢复时间(≤7天)较长时,潮霉素B浓度应适当提高.水稻幼胚诱导的胚性愈伤的转化效率高于成熟胚.利用mtlD基因M5'引物和M3'引物,对抗性再生植株进行PCR检测证明,目的基因已插入到旱稻和水稻基因组中.T<,1>代转基因植株PCR扩增、Dot blotting、Southern blotting和Northern blotting检测表明mtlD基因已整合到旱稻和水稻基因组中,并在T<,1>代转基因植株中稳定表达.T<,1>代转基因植株在含1﹪NaCl的培养基上正常生长,阴性对照在相同培养基上生根困难,40天内全部死亡;土培条件下,T<,1>代转基因植株可在含0.75﹪NaCl土中生长,未转化植株死亡.转基因旱稻、水稻的叶片相对电导率和地上地下部Na<'+>、K<'+>含量测定结果进一步说明mtlD基因在旱稻和水稻中的表达提高了水稻和旱稻的耐盐性.
旱稻;水稻;基因枪转化;mtlD基因;耐盐性
中国农业大学
硕士
作物遗传育种
李自超;庄炳昌
2002
中文
S511.035.3
61
2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）