人巨细胞病毒pp150基因的原核表达及抗原性分析
目的：构建人巨细胞病毒（HCMV）pp150的原核高效表达系统,制备用于活动性HCMV感染血清学诊断的基因工程抗原.方法：利用DNA Star软件设计HCMV AD169株pp150基因片段引物,并引入EcoR1酶切位点和HindⅢ酶切位点.PCR扩增HCMV pp150抗原决定簇（840-1048aa）编码基因片段;目的基因分别与原核表达载体pMAL-p2、pET-28a连接,转化宿主菌E.coli.;IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测表达情况;表达的融合蛋白经麦芽糖亲和层析树脂纯化;以Western-blot鉴定其抗原性,检测了15份HCMV IgM阳性血清;重组抗原包被ELISA板,检测了263份正常孕妇血清.结论：此重组蛋白具有良好的抗原性,进一步完善后用于HCMV急性和/或活动性感染的诊断.
人巨细胞病毒;pp150基因;原核表达;血清学诊断
青岛大学
硕士
病原生物学
张文卿
2002
中文
R373
44
2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）