基于夹心平板法分离海洋芽胞杆菌及菌株促生机制探究
海洋中蕴含了丰富的微生物资源，对全球生物量的贡献巨大，是地球系统的重要组成部分，但是目前全球绝大多数微生物仍处于未培养状态，芽胞杆菌就是其中的代表之一。芽胞杆菌可以分泌代谢大量且多样的次级代谢产物，既可以用于合成新的天然活性产物，可以应用于各行各业，使得芽胞杆菌在微生物领域具有重要的科学意义和深远的应用潜力与前景。然而缺乏有效的特异性分离芽胞杆菌的培养技术是目前限制芽胞杆菌资源开发利用的一大问题。 本研究基于目前微生物培养中存在的一部分问题，围绕夹心平板技术，从分离芽胞杆菌的角度，特异性分离芽胞杆菌来获取芽胞杆菌新类群，开发芽胞杆菌的相关资源及其培养过程中可能存在的细胞互作机制进行了相关研究，主要研究结果可以归纳为以下几点: （1）通过16SrRNA基因扩增子测序筛选出夹心平板法中适合分离培养海洋芽胞杆菌的助长菌（“helper”菌）。 （2）成功分离342株芽胞杆菌的可培养菌株，并通过16SrRNA基因扩增子测序方法分析夹心平板S24培养基与对照培养基上的可培养样本，从物种组成分析以及样本比较分析两方面分析，说明S24作为“helper”菌的效果，也表明夹心平板法在特异性分离芽胞杆菌的有效性，其可以作为分离芽胞杆菌的行之有效的一种标准方法。 （3）通过共培养实验，发现分离菌株中有201株细菌可与“helper”共培养而显著加速或促进其生长，另外通过基因组注释探究其中部分被促生菌株的促生机制，发现严格依赖“helper”菌株生长的部分菌株不能独立生长的原因。 综上所述，采用前人基于偏利共生的原理，研究设计的一种简便、高效、易操作、可大量分离未培养微生物并获得纯培养菌株的方法——夹心平板法，将其应用于特异性分离海洋环境中的芽胞杆菌新类群，结合16srRNA扩增子测序，进一步比较夹心平板法对芽胞杆菌类群多样性的影响，建立一种靶向分离海洋芽胞杆菌的方法，并对部分严格依赖“helper”菌株生长的菌株的促生机制进行初步探究。
海洋芽胞杆菌;夹心平板法;特异性分离;微生物培养;促生机制
山东大学
硕士
微生物学
杜宗军
2023
中文
Q938.8
2023-10-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）