靶向免疫检查点蛋白HVEM的多肽抑制剂筛选及活性研究
免疫检查点抑制剂的应用是癌症免疫疗法的热点之一，免疫检查点受体和配体的相互作用可以影响免疫系统的激活和抑制，而抗体药物的临床成功证明，阻断抑制性免疫检查点通路对于癌症免疫治疗是一种有前途的策略。B和T淋巴细胞弱化因子（BTLA）是一种类似于细胞毒性淋巴细胞抗4（CTLA-4）和程序性死亡受体1（PD-1）的抑制性受体，BTLA蛋白通过与其唯一配体疱疹病毒进入介质（HVEM）结合来调控T细胞的活化，而癌细胞通常过表达HVEM蛋白实现免疫逃逸现象。这一特征使其具备作为新型免疫疗法的靶标的潜力。 在这里，我们利用噬菌体展示技术筛选出了四条多肽后，通过表面等离子体共振（SPR）测定多肽与HVEM间的结合，并用竞争性酶联免疫吸附试验（ELISA）测试了多肽抑制BTLA/HVEM复合物形成的能力。其中多肽P1（其序列为GCTCPRGWVCLAREPC）效果最佳。进一步对P1进行研究，发现P1的线性、P1-c（1-3,2-4）和 P1-c（1-4,2-3）三种构型与HVEM均具有较高的结合亲和力，均能有效干扰BTLA/HVEM间相互作用，其中P1-c（1-4,2-3）与HVEM间亲和解离常数最低为1.46×10-7 M，但在竞争性抑制方面，P1-1更占据优势，在相同实验条件下，P1-1半抑制浓度为P1-c（1-4,2-3）的1/5,我们认为线性多肽上游离的半胱氨酸对多肽与HVEM结合存在促进作用。P1对于人外周血单核细胞（PBMC）没有细胞毒性，同时不存在溶血性。此外，P1的三种构型均能够解除HVEM蛋白带来的免疫抑制现象，刺激PBMC的增殖和活化。 综上，P1能够通过阻断BTLA/HVEM相互作用表现出解除免疫抑制的能力，释放免疫系统的功能，P1可作为癌症的免疫治疗的潜在药物前体。
多肽抑制剂;免疫检查点蛋白;噬菌体展示技术;抗肿瘤活性
北京化工大学
硕士
生物工程
罗施中
2023
中文
R979.1
2023-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）