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目录
第1章引言
1．1．2β-葡聚糖的功能及应用
1．1．3β-葡聚糖受体
1．2黑色素形成
1．2．1脊椎动物的黑色素合成过程
1．2．2黑色素合成相关基因简介
1．2．3黑色素合成过程的信号调控
1．3黑色素转运
1．4斑马鱼简介
1．4．1斑马鱼胚胎发育过程
1．4．2斑马鱼作为模式生物的优势
1．4．3斑马鱼作为研究黑色素生物模型的进展
1．5本研究的目的和意义
第2章材料与方法
2．1实验动物
2．1．1斑马鱼循环系统
2．1．2成年斑马鱼饲养方法
2．1．3斑马鱼的繁育及幼鱼的喂养
2．2实验试剂与仪器
2．2．1常用实验试剂
2．2．2主要仪器设备
2．3实验技术和方法
2．3．1半定量PCR法检测黑色素合成相关基因的表达
2．3．2斑马鱼黑色素合成相关基因探针的分子克隆
2．3．3斑马鱼整胚原位杂交
2．3．3mRNA的制备与显微注射
2．3．4检测酪氨酸酶的活性
2．3．5Western Blot
2．4斑马鱼体表黑色素的定量分析
2．5基因mRNA表达的定量分析
2．6蛋白表达的定量分析
第3章实验结果与分析
3．1．2验证β-glucan对斑马鱼体表黑色素沉积的抑制作用
3．1．3小结
3．2β-glucan对由体外和体内条件诱导形成的黑色素堆积具有明显的抑制作用
3．2．1β-glucan可显著抑制由促黑素刺激引起的体表黑色素沉积
3．2．2β-glucan可抑制过表达mitfa和tyr诱导的黑色素沉积
3．2．3小结
3．3．1半定量PCR检测β-glucan对黑色素合成相关基因表达量的抑制效果
3．3．2整胚原位杂交技术检测斑马鱼黑色素相关基因mRNA的时空表达
3．3．3小结
3．4．2β-gluean处理能显著抑制酪氨酸酶活性
3．4．3小结
3．5．1β-glucan通过下调mitfa表达抑制黑色素细胞分化而减少黑色素形成
3．5．2β-glucan通过cAMP／PKA信号通路抑制黑色素形成
3．5．3小结
3．6β-glucan对斑马鱼黑色素的抑制效果具有可逆性
3．7本章总结
第4章讨论与展望
4．1．2β-glucan进入细胞的猜想
4．2实验意义与展望
实验特色与创新点
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表论文