HOMER3的生物学功能及其对结直肠癌患者预后的影响
研究背景和目的 结直肠癌(ColorectalCancer,CRC)是目前威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一，其致死率在所有癌症中排行第二。诸多研究表明，结直肠癌发病依赖于多种基因的改变。因此，科学探究结直肠癌发生发展的分子机制，筛选有效的生物标志物用于结直肠癌的早期诊断和预后评估至关重要。既往研究主要报道HOMER作用在神经系统中，后续发现其在人类癌症如食管癌及乳腺癌中表达以调节细胞生长，迁移和凋亡，从而在癌变过程中发挥重要作用。然而，HOMER蛋白家族在人结直肠癌中的作用尚未有文献报道。本课题研究旨在分析检测HOMER3在结直肠癌中的表达情况、研究其与患者总体生存的相关关系，探究其在结直肠癌转移中的作用机制。 研究方法 ①从公共数据库下载结直肠癌的基因表达数据及临床数据，分析HOMER3在肿瘤中的表达及其与患者预后的关系。②通过单因素和多因素COX分析确定HOMER3是否是结直肠癌预后的独立影响因素。③构建生存相关的风险评估模型和临床预后模型，计算样本的风险值，评估高、低风险组样本总体生存差异，ROC曲线评估该模型5年生存的预测能力，绘制校准曲线观测模型预测的一致性。④根据风险评分对患者进行性别、年龄及分期等分层，生存分析证明风险模型的评估作用。⑤通过GO和KEGG分析探索HOMER3在结直肠癌中的潜在作用机制。⑥qRT-PCR和Westernblot检测HOMER3在结直肠癌细胞株中的表达，siRNA敲低HOMER3表达后进行细胞划痕实验、Transwell迁移实验和CCK8细胞增殖实验初步探索HOMER3对结直肠癌细胞生物学功能的影响。 研究结果 ①HOMER3在结直肠癌中表达上调，其表达量与肿瘤分期呈正相关，是结直肠癌患者生存预后的独立预测指标，HOMER3表达量越高，总体生存期越短。②本研究构建的风险评估模型可以较好地将不同生存预后的患者区分开来，训练组、内部验证组和外部验证组AUC分别为0.798、0.704和0.710，具有较高的预测价值。③在列线图中，根据HOMER3表达情况、年龄、肿瘤分期预测结直肠癌患者三年和五年生存率，校准曲线显示模型预测结果与实际值接近，模型较可靠。④利用风险评分对不同年龄、性别和分期的病人进行分层分析结果发现高风险组的预后均显著差于低风险组。⑤HOMER3在RKO细胞中表达量相对较高，用siRNA沉默HOMER3表达后进行实验发现:与NC组相比，si-HOMER3组在划痕实验、Transwell实验和CCK8实验中表现出相较NC组更弱的增殖、迁移和侵袭能力。 结论 HOMER3是结直肠癌预后的独立预测指标，高表达HOMER3基因的结直肠癌患者的5年生存率较低。基于此我们构建了COX风险回归模型和临床预后预测模型对患者进行区分，筛选出高风险的患者群体，便于预测其生存预后，指导诊疗，制定个体化的治疗方案。探究HOMER3影响结直肠癌生物学功能的实验发现沉默HOMER3表达后能抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
结直肠癌;生存预后;HOMER3;生物学功能
南方医科大学
硕士
外科学（普外）
薛琪
2021
中文
R735.3
2023-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）