Wnt7b在结直肠癌细胞转移中的作用及调控机制研究
目的:结直肠癌(colorectalcancer，CRC)是最常见的胃肠道肿瘤之一。当前Wnt信号级联在结直肠癌进展中的重要地位己成为共识，可以作为临床治疗结直肠癌的潜在靶标。Wnt7b是Wnt信号通路的配体之一，但其在结直肠癌发生进展中的功能与作用机制还有待探索。我们通过生物信息学在线分析网站得出Wnt7b在多种胃肠道肿瘤中异常高表达，本文主要探究Wnt7b调控Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌SW480细胞的增殖、迁移和侵袭作用影响。 方法:基于TCGA数据库分析结直肠癌组织与正常组织间的Wnt7b的表达差异，实时荧光定量PCR和Westemblotting检测Wnt7b在结直肠癌细胞系和正常肠上皮细胞中的表达。通过转染shRNA，敲低结直肠癌细胞SW480中的Wnt7b，成功沉默Wnt7b后通过MTT比色法，双染流式细胞术，细胞划痕实验以及Transwell侵袭实验来评估SW480的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化，深入探究Wnt7b对结直肠癌细胞的生长，迁移和侵袭的影响。 结果:选取TCGA数据集，分析发现Wnt7b在大多数的胃肠道肿瘤样本中的表达高于正常组织。q-PCR，Westemblotting(WB)结果显示与正常肠上皮细胞相比，Wnt7b在不同的结直肠癌细胞系中均显著高表达。采用sh-Wnt7b质粒转染了SW480细胞，q-PCR和WB结果显示成功敲减了Wnt7b。MTT比色法结果显示与未转染组相比sh-Wnt7b组细胞增殖能力显著下降。双染流式细胞术结果表明sh-Wnt7b组细胞凋亡更多。划痕实验结果显示sh-Wnt7b组细胞迁移率明显降低。Transwell侵袭实验结果表明sh-Wnt7b组细胞侵袭数目显著减少。SW480转染sh-Wnt7b后，Westemblotting检测该组β-catenin，CCND1，CD44的蛋白水平均降低，q-PCR检测mRNA得到了同样的结果。 结论:Wnt7b在结直肠癌细胞中表达水平更高，并通过激活Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠癌细胞的增殖，迁移和侵袭作用。Wnt7b有望成为治疗结直肠癌的候选靶点。
结直肠癌;Wnt/β-catenin信号通路;细胞转移;Wnt7b
武汉科技大学
硕士
基础医学
郭凯文
2022
中文
R735.3
2023-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）