Q808对癫痫大鼠脑组织Wnt3a/β--catenin信号通路及神经元凋亡的调控作用
目的:探讨Q808(6-(4-Chlorophenoxy)-tetrazolol(5，1-a)phthalazine，Q808)对颞叶癫痫(Temoorallobeepilepsy，TLE)大鼠脑组织海马神经元凋亡的影响，以及是否通过影响凋亡相关的Wnt-3a及β-catenin（β连环蛋白）蛋白的表达进而调控神经细胞的凋亡，为小儿癫痫疾病的治疗提供新的思路。 方法:选择7±1周健康雄性清洁级SD大鼠45只，随机分为正常对照组(n=10)和实验组(n=35)。实验组大鼠采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品的方法建立颞叶癫痫模型。将造模成功的30只大鼠进一步随机分成癫痫组(n=10)、Q808组(n=10)和托吡酯(TPM)组(n=10)。Q808组和托吡酯组分别灌胃Q808(80mg/kg)和TPM（40mg/kg），同时正常组和癫痫组分别灌胃生理盐水（1ml/kg），每日1次共28天。应用脑电图设备记录1周各组大鼠的脑电波情况，治疗结束后将大鼠断头并取出海马组织，通过HE染色法观察大鼠海马神经元的病理变化情况，运用免疫组化法和WesternBlot分别检测海马组织内β-catenin和Wnt3a蛋白的表达水平。 结果: 1.造模结果:诱发后的大鼠均出现癫痫发作的表现，包括眨眼、动须、规律性咀嚼及点头，四肢阵挛，部分大鼠还出现摔倒的情况。其癫痫发作程度均≥IV级，建造模型成功。 2.脑电图结果:从总发作时长来看:与正常组比，TLE组、Q808组和TPM组癫痫发作的时长显著延长(P＜0.01)。与TLE组相较，Q808和TPM两组的发作时长明显缩短(P＜0.05)，但TPM组与Q808组间无明显统计学差异(P＞0.05)。 从发作频率比较:与正常组比，TLE组、Q808组和托吡酯组的发作频率显著增多（P＜0.01）。与TLE组相比，Q808组的发作频率是降低的(P＜0.05)，且TPM组的发作频率降低得更为显著(P＜0.01)，同样的，Q808和TPM两组间比较无显著差异(P＞0.05)。 3.HE染色结果:正常对照组细胞数目较多，大小形态及排列规则有序，TLE组则相反，细胞数目较少，大小形态及排列杂乱无序，细胞质染色较深，细胞核呈固缩或碎裂状。Q808、TPM两组与TLE组相比上述变化有所改善。 4.免疫组化结果:与正常组相比，TLE组海马组织的β-catenin表达明显升高（P＜0.01），Q808组β-catenin表达亦有所升高（P＜0.05）。而托吡酯组及Q808组β-catenin的表达与癫痫组比较均降低(P＜0.01)，但TPM组和Q808组间无明显差异（P＞0.05）。 与正常组比，TLE组及Q808组海马组织Wnt3a的表达明显升高（P＜0.01），TPM组Wnt3a表达亦有升高(P＜0.05)。托吡酯组、Q808组Wnt3a的表达与癫痫组相比明显降低，差异有统计学意义(P＜0.01)，但是TPM与Q808两组间比较无明显差异（P＞0.05）。 5.Westernblot结果:对Wnt3a蛋白的检测，与正常组比，TLE组大鼠海马Wnt3a蛋白表达升高显著(P＜0.01)，药物组（Q808组、TPM组）Wnt3a蛋白表达同样是升高的(P＜0.05)。与癫痫组相比，Q808组及托吡酯组大鼠海马Wnt3a蛋白的表达显著降低(P＜0.01)，但Q808及TPM两组之间无明显差异(P＞0.05)。 对β-catenin蛋白的检测，与正常组相比，TLE组及Q808组β-catenin蛋白表达明显升高(P＜0.01)，TPM组β-catenin蛋白表达同样有升高(P＜0.05)。与癫痫组相比，Q808组、托吡酯组及正常对照组大鼠海马的β-catenin蛋白表达均显著降低(P＜0.01)。但托吡酯与Q808组间比较无显著差异（P＞0.05）。 结论: 1.Q808可以减轻氯化锂-匹罗卡品引起的癫痫大鼠海马病理改变的程度。 2.Q808及TPM对癫痫大鼠大脑异常放电有抑制作用。 3.Q808可能调控癫痫大鼠海马中的凋亡因子，进而起到保护神经元的作用。 4.Q808和TPM两者均可减轻癫痫对大鼠脑神经元的损伤，其神经保护作用相似。
癫痫;Q808;神经元凋亡;Wnt3a/β-catenin信号通路;调控作用
延边大学
硕士
儿科学
李今子
2022
中文
R742.1
2022-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）