赤芍水溶性成分及其生物活性的研究
中药赤芍为我国传统中药，来源于毛茛科Ranunculaceae芍药属Paeonia芍药P.lactifloraPall.或川赤芍P.veitchiiLynch的干燥根，具有清热凉血、散瘀止痛之功效。 芍药苷为赤芍的主成分，含量最高可达8％，被认为是赤芍的指标性成分。现代研究证实，芍药苷具有抗血小板聚集、抗血栓、抗动脉粥样硬化、保护心肌细胞、改善微循环、抗炎、免疫调节、抗抑郁和抗肿瘤活性。本课题组前期研究表明，赤芍(基原植物P.lactifloraPall.)水浸超声提取物经大孔吸附树脂和MCI柱色谱处理剔除芍药苷后，得到的一个分离部位CS-4在多种体内外模型上，仍具有抗炎、抗肝纤维化、抗过敏、抗氧化和抗糖尿病等活性。前期李瑞硕士(已毕业)已部分完成了该部位的研究，从中分离鉴定化合物49个，其中14个新化合物，部分化合物显示出较好的抗氧化活性，但未在其它药理模型上筛选出活性较好的化合物。为了深入发掘CS-4部位中其他新型活性成分，本课题通过凝胶SephadexLH-20、HPLC等色谱分离手段，结合HRESIMS、NMR等波谱分析和计算ECD方法，从CS-4部位剩余组分中分离鉴定了化合物42个，包括单萜及其苷类化合物29个、倍半萜及其苷类化合物7个、木脂素及其苷类化合物5个以及苯酚类化合物1个，其中新化合物9个(化合物1*-9*)，化合物1*-4*为新芍药苷类化合物、化合物5*和6*为蒎烷型单萜酮类化合物、化合物7*-9*为杜松烷型倍半萜及其苷类化合物(化合物编号、名称与结构如Table1和Figure1所示)。 根据前期CS-4的活性筛选结果，我们对本课题以及课题组前期从CS-4部位分离的18个芍药苷衍生物进行了抗过敏活性筛选。结果表明，11个化合物表现较好的抗过敏活性(EC50＜100μM)，其中苯甲酰芍药苷可以显著降低RBL-2H3细胞的HIS和β-HEX水平(EC50值分别为6.88±1.30和26.31±2.2μM)。我们采用脱颗粒试验、H-DC活性测定、序列与结构比对、ELISA试验、westernblot和分子对接等方法，发现苯甲酰芍药苷通过占据HDC活性位点来抑制L-组氨酸向HIS的转化，同时抑制MAPK信号通路下游蛋白ERK1/2、JNK和p38，从而下调IL-3、IL-4、IL-5和IL-13的产生，并且可以减轻细胞骨架和线粒体膜的损伤。进一步体内活性评价，发现苯甲酰芍药苷对BALB/c小鼠具有显著的抗PCA作用。这也是首次发现苯甲酰芍药营通过双重抑制HDC和MAPK信号通路发挥抗过敏活性。 同时，基于时间荧光分辨(HTRF)法，发现化合物12和34具有较好PD-1/PD-L1体外抑制活性，IC50分别为33.8±1.7和57.4±3.2μM。但所分离到的化合物在细胞毒、神经保护、抗氧化等方面未表现出显著活性。
赤芍;单萜化合物;PD-1/PD-L1抑制剂;水溶性成分;生物活性
中国医学科学院北京协和医学院
硕士
药物化学
林生;石建功
2020
中文
R284.1
2021-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）