调节性B细胞在原发性胆汁性胆管炎免疫机制中的作用
背景和目的 调节性B细胞(regulatory B cells，Breg)是近些年发现的具有免疫负调节功能的B细胞亚群，现已发现Breg在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、多发性硬化等多种自身免疫疾病中存在数量及功能异常，提示Breg在这些疾病的致病及发展过程中可能起到重要作用。PBC为典型的自身免疫性疾病，但免疫调节治疗如B细胞清除在PBC却未取得预期的疗效，另外B细胞清除在PBC动物模型中的试验结果也进一步提示除浆细胞外调节性B细胞在PBC致病及发展过程中也起到了重要作用，目前国内外缺乏PBC调节性B细胞功能状态的研究，因此本课题拟探究调节性B细胞在原发性胆汁性胆管炎免疫机制中的作用。 方法 收集PBC患者及健康对照外周血，分离PBMC，流式细胞技术测定CD19+CD24hiCD38hi(过渡Breg)、CD19+CD27+CD24hi(记忆Breg)、CD19+CD27intCD38+(浆母样Breg)占CD19+B细胞比例，同时测定各Breg表面分子CD80、CD86、CD40、IL21r表达情况。利用LeukocyteActivationCocktail体外刺激孵育5小时后测定各Breg产IL10表达水平，加入IL21更改刺激条件，探究IL21对Breg产IL10的影响。 结果 1.本研究共纳入PBC患者23例，其中女性21例，男性2例，平均年龄为55±12.09岁，中位病程为24个月，纳入年龄、性别相匹配健康对照39例。 2.PBC患者外周血记忆Breg占CD19+B细胞比例较健康对照组显著降低(9.57±5.97VS15.67±7.42P＜0.01)，而过渡Breg占CD19+B细胞比例较健康对照组显著升高(5.90±3.2VS4.43±1.56P=0.02)，PBC患者与健康对照浆母样Breg占CD19+B比例无显著差异(1.50±1.13VS1.61±0.91P=0.71)，PBC患者成熟B细胞占CD19+B细胞比例较健康对照组显著升高(42.65±9.29VS37.09±7.22P=0.02)。 3.过渡Breg占CD19+B细胞的比例与TBA呈显著正相关(r=0.57，p=0.01)，与IgG呈显著正相关(r=0.61，p=0.01)，与IgA呈显著正相关(r=0.66，p=0.00)，与ESR呈显著正相关(r=0.61，p=0.02)。记忆Breg占CD19+B细胞比例与IgG、IgA、ESR成负相关，但是无显著性(r=-0.24，p=0.33;r=-0.36，p=0.13;r=-0.51，p=0.05)。 4.PBC患者CD80在过渡Breg、CD19+B细胞表达比例较健康对照显著降低(1.31±1.26VS4.59±3.79P=0.006，5.56±4.43VS9.78±5.95P=0.046)。PBC患者CD86在浆母样Breg表达比例较健康对照显著升高(36.55±23.31VS14.65±14.06p=0.007)。PBC患者CD40在过渡Breg表达比例较健康对照显著升高(5.13±4.96VS1.55±1.67p=0.023)，PBC患者CD40在记忆Breg细胞表面表达平均荧光强度较健康对照显著升高(68.01±22.06VS50.48±15.49P=0.036)。PBC患者IL21r在过渡Breg表达平均荧光强度较健康对照显著降低(218.00±67.00VS290.00±76.00p=0.033)。 5.记忆BregIL10表达水平显著高于过渡Breg(19.60±3.79VS11.62±1.97p=0.000)。在相同条件下PBC各Breg产IL10水平较健康对照无显著差异。 6.AC+21组浆母样Breg产IL10B细胞比例较AC组显著增加(21.80±9.02VS19.34±3.82p=0.008)，AC+21组过渡Breg、浆母样Breg产IL10的平均荧光强度较AC组显著增加(150.80+23.30VS116.80+11.88p=0.046，261.20+108.72VS200.40+51.66p=0.002)。 结论 PBC患者外周血Breg比例功能存在紊乱，过渡Breg比例显著升高，而记忆Breg比例显著减少，且过渡Breg与记忆Breg比例呈显著负相关。Breg水平与IgG、ESR、TBA有一定的相关性。Breg比例与CD80、CD86表达水平有一定相关性。PBC患者各Breg亚群表达IL10水平与健康对照相比无明显差异。IL21能提高BregIL10表达水平，而PBC患者BregIL21受体表达水平降低参与了PBCBreg功能紊乱。
原发性胆汁性胆管炎;调节性B细胞;IL-21;免疫机制
中国医学科学院北京协和医学院
博士
临床医学
张奉春
2020
中文
R575.7
2021-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）