毛国杨HDA909基因的克隆及功能分析
本研究从毛果杨中克隆了组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的RPD3/HDA1亚家族基因HDA909，研究了其蛋白质序列、基因的表达及在干旱和真菌胁迫应答反应中的功能。 (1)毛果杨HDA909基因的ORF序列长度为1323bp，编码一个由440个氨基酸构成的酸性、亲水性蛋白质，其等电点为5.28。毛果杨HDA909蛋白质的N端存在一个HDAC结构域。进化树分析结果显示，HDA909在进化上与胡杨HDA6亲缘关系最近。 (2)毛果杨HDA909基因表达分析结果表明，在毛果杨不同器官中HDA909基因均可以表达，但在不同器官的表达没有特异性。 (3)构建GFP-HDA909融合基因表达载体，采用基因枪法将其导入洋葱表皮细胞中，观察荧光信号，结果显示，HDA909蛋白在细胞核中定位。 (4)构建pROKII-HDA909过量表达载体，将HDA909基因通过农杆菌介导法转化到毛果杨中，并分析HDA909基因在干旱胁迫和真菌胁迫下的功能。在甘露醇处理下，转基因与野生型幼苗在株高、根长、根数和鲜重上没有显著性差异。在干旱处理下，转基因与非转基因植株在株高和地径上也无显著性差异。离体叶片接种链格孢菌后，转基因植株叶片的菌斑数和菌斑面积均比非转基因植株低。DAB染色结果表明，过氧化氢在转基因植株叶片细胞中积累的较少，叶片受损程度较小。以上结果表明，HDA909基因的过量表达不影响杨树对干旱胁迫应答的耐受性，但在杨树真菌胁迫应答反应中具有重要的作用。
毛果杨;真菌胁迫;干旱胁迫;组蛋白去乙酰化酶;基因克隆
东北林业大学
硕士
林木遗传育种
马旭俊
2020
中文
S792.110.1
2021-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）