IRAK--M单核苷酸多态性在哮喘发生中的作用及其转录调控机制研究
目的:IL-1R相关激酶(IRAK)-M在哮喘气道炎症期间能够调节肺脏免疫。然而，当气道炎症持续时IRAK-M的调节作用不同。IRAK-M单核苷酸多态性与儿童哮喘发病相关已有报道，但目前仍缺乏IRAK-M单核苷酸多态性与成人哮喘关系的研究。在本研究中，我们将探讨IRAK-M基因组区域单核苷酸多态性在中国北方汉族成人哮喘发生中的作用及其转录调控机制。 方法:(1)所有研究对象均来自于北京协和医院或民航总医院。哮喘诊断均由有经验的经过统一培训的呼吸内科专家根据中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的支气管哮喘诊断标准作出。哮喘组共纳入679例中国北方汉族成人哮喘患者，对照组共纳入669例健康体检者。所有患者均需完成详细的病史采集、肺功能检查、血常规检查及血清IgE检查，并采集外周静脉血用于基因单核苷酸多态性检测。选取IRAM-M基因组区域9个SNP，采用SNaPshot技术进行外周血SNP分型，进行基于群体的成人哮喘遗传易感性分析;(2)应用荧光定量PCR技术，分析SNP位点rs1624395不同等位基因对哮喘患者外周血IRAK-MmRNA表达水平的影响;(3)利用公共数据库信息预测SNP位点rs1624395结合的转录因子，运用EMSA技术比较rs1624395-A突变体及rs1624395-G突变体与转录因子c-Jun的结合能力。 结果:(1)2个IRAK-MSNP(rs1624395和rs1370128)与成人哮喘显著相关(OR=1.227,95％CI:1.054-1.428,p=0.008;OR=1.187,95％CI:1.020-1.381，p=0.027)。rs1624395的纯合子GG基因型和rs1370128纯合子CC基因型在成人发病的中国北方汉族哮喘患者中更常见(p=0.025和p=0.009)。应用Logistic回归分析校正性别和年龄的影响后，组间差异仍有统计学意义(p=0.003)。单体型GTAT具有保护效应(p=0.0079)。此外，IRAK-M基因座中的SNP与许多哮喘表型特征相关，rs7970350与血嗜酸性粒细胞计数显著相关(p＜0.05)，rs2141709与气流阻塞(FEV1实测值/预计值％和FEV1/FVC％)显著相关(p＜0.05)，rs1821777与FEV1实测值/预计值％、血清总IgE水平显著相关(p＜0.05)，以及rs1624395与患者血清总IgE水平显著相关(p＜0.05)。(2)rs1624395AG或者GG基因型的哮喘患者外周血中IRAK-M转录变异体1的mRNA水平高于AA基因型患者，差异有统计学意义(p＜0.001)。(3)EMSA实验表明，rs1624395-G突变体和rs1624395-A突变体均能与转录因子c-Jun结合;但是rs1624395-G突变体与c-Jun结合的滞后带较rs1624395-A突变体与c-Jun结合的滞后带更为明显。 结论:本研究首次在中国北方汉族成人哮喘人群中验证了rs1624395及rs1370128与成年哮喘的关联;在该人群中rs1624395G等位基因及rs1370128C等位基因为中国北方汉族成人哮喘风险等位基因;IRAK-M的一个单倍型(GTAT)可能是潜在的保护因素，可以降低哮喘的风险;携带rs1624395G等位基因会导致哮喘患者外周血IRAK-M其中一个转录变异体的表达水平显著升高。EMSA实验结果表明rs1624395-G等位基因与c-Jun转录因子结合强度较rs1624395-A等位基因更高。这提示rs1624395位点极有可能属于功能变异，通过改变c-Jun转录因子与DNA结合能力促进IRAK-M表达而增加哮喘易感性。这些研究结果为深入理解IRAK-M在哮喘发病机制中的作用提供了理论基础，也为通过靶向作用于IRAK-M治疗哮喘带来一定的启发意义。
哮喘;IL-1R相关激酶-M;单核苷酸多态性;转录调控
中国医学科学院北京协和医学院
博士
内科学（呼吸）
高金明
2019
中文
R562.25
2020-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）