应用WHO 2015肺癌分类标准回顾性分析组织学低分化实性结构肺癌的免疫表型和分子亚型特征的研究
第一部分不能分类的肺癌-NUT癌和肺原发淋巴上皮瘤样癌的临床病理学研究及NUT癌基因组学研究 研究背景:2015版WHO新列出NUT癌，并将NUT癌和肺原发淋巴上皮瘤样癌(PPLELC)单列出来分为不能分类组。这是两种很独特的肿瘤，其发病机制、流行病学、临床表现、组织学形态、诊断方法、治疗方案的选择及预后都不同。而这两种肿瘤部分形态和免疫表型与鳞癌重叠，以往可能误诊为肺鳞癌。我们回顾了以往的肺鳞癌病例，用组织微阵列技术(TMA)，从临床特征、病理形态、免疫组化、分子病理、基因组学等各方面重新诊断这两类肿瘤，以期提高对其的认识和诊断。 材料和方法:本研究回顾性分析了中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院2014年1月1号-2017年4月24日外科手术切除的肺中-低分化鳞癌918病例的临床病理资料、调取切片及蜡块制备组织芯片(组织微阵列技术TMA)，进行免疫组化NUT、CD99、CD56、CD34、GPC3、MLH1，MSH2，MSH6，PMS2抗体的染色和EBER原位杂交，筛选出肺NUT癌和PPLELC，进一步研究NUT癌的荧光原位杂交(FISH)、NGS检测NUT癌全外显子基因组改变，总结NUT癌和PPLELC的临床、病理、基因组学特征及随访结果。 结果:1，本组病例:男性822例(89.54％)，女性96例(10.45％);男女比例为8.56∶1，中位年龄是67岁，范围33-84岁，主要为老年人，大于60岁的患者618例(67.32％)。肿瘤主要为中央型，累及叶段支气管686例(74.73％)，有267例(29.08％)累及胸膜。根据AJCC第八版重新进行T分期和N分期，T2期肿瘤最多，263例(28.65％)。有肺门及周围淋巴结累及的病例为372例(40.52％)。300例(32.68％)肿瘤中可见基底样鳞状细胞癌的分化，其中比例超过50％的病例有155例(155/300，51.67％)。713例(77.67％)的病例出现了至少30％的区域有较为密集的炎细胞浸润，炎细胞浸润范围广(＞60％)，较密集(＞80个/HPF)的有67例(9.4％)。2，918例中低分化鳞癌中NUT蛋白核阳性的病例有2例(0.22％)，另有13例(1.41％)可见不同程度的胞浆阳性。中低分化的鳞癌对CD99、CD56、CD34、GPC3都有不同程度的阳性表达，分别为47例(5.12％)，31例(3.38％)、8例(0.87％)和150例(16.34％)。13例(1.42％)有错配修复蛋白(MMR)的缺失，MLH1/PMS2缺失有8例(0.87％);PMS2缺失有3例(0.33％);MSH6缺失有2例(0.22％)。EBER原位杂交阳性的病例有3例(0.33％)。3，FISH证实2例免疫组化NUT核阳性的病例存在NUT基因的分离，而13例NUT胞浆阳性的病例没有NUT基因的分离。4，两例NUT癌(0.22％)的患者都是44岁男性，手术时分别为ⅢB期和ⅣA期，于手术后9个月和6个月去世。组织学形态为较为一致小-中等大的圆细胞，例1可见突然角化灶。5，NUT癌NGS全外测序结果，两例患者的TMB分别为2.63突变/MB和7.2突变/MB;分别可见NUT与NSD3的融合及NUT与BRD3的融合;将测序结果与2012年TCGA发表的肺鳞癌的基因组学筛选出来变化最多的10个基因做比对，除了例2具有MLL2(KMT2D)的突变以外，基本不一致。6，3例PPLELC(0.32％)，分别为43岁男性、38岁男性和44岁女性，手术时为ⅢA、IA3和IA2期。随访31-36个月，都健在。67例富于淋巴间质的肺癌中，3例(4.48％)EBV+，9例(13.43％)dMMR，还有55例(82.09％)两者皆阴性。 结论:肺NUT癌和PPLELC是两种独特的肿瘤，其发生机制、流行病学、临床表现、组织学形态、诊断方法、治疗方案的选择及预后都不同，需要从肺鳞癌中鉴别出来，以便更为精准的治疗。 关键词:肺NUT癌;肺原发淋巴上皮瘤样癌;肺富于淋巴间质的癌;肺鳞癌 第二部分实性低分化肺癌167例的病理分型及其表皮生长因子受体基因突变和间变性淋巴瘤激酶检测结果 目的探讨实性低分化肺癌通过免疫组织化学和特殊染色进一步病理分型，及其表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和间变性淋巴瘤激酶(ALK)检测情况。 方法回顾北京医院过去3年非小细胞肺癌827例，找出167例的实性低分化肺癌通过黏液特殊染色(D-PAS)和一组免疫组织化学10个抗体[细胞角蛋白(CK)7、波形蛋白、Ki-67、CK5/6、p40、甲状腺转录因子1、NapsinA、CD56、嗜铬粒素A、突触素]行进一步病理分型;采用扩增阻滞突变系统(ARMS)法对EGRF基因第18、19、20、21号外显子进行基因突变检测;用免疫组织化学VentanaALK(D5F3)检测ALK的突变并用荧光原位杂交(FISH)验证。 结果患者中女性79例，男性88例;年龄35～77岁，中位年龄62岁。镜下＞10％的癌组织排列成巢片状，缺乏腺癌、鳞状细胞癌(简称鳞癌)和神经内分泌癌典型的形态学排列的病例，行免疫组织化学和特殊染色分型为腺癌64例(38.32％)、鳞癌34例(20.35％)、大细胞神经内分泌癌21例(12.57％)、复合型大细胞神经内分泌癌5例(2.99％)、腺鳞癌2例(1.20％)、大细胞癌41例(24.56％);Ki-67阳性指数5％～65％。5例(7.81％)腺癌中可见EGFR突变(19del3例、L858R2例)，2例(3.12％)腺癌免疫组织化学VentanaALK(D5F3)阳性，经FISH验证有基因重排。 结论缺乏形态分化特征的实性低分化肺癌可以通过免疫组织化学和特殊染色进一步分型和行分子病理学检测，从而寻找分子靶点为患者提供更为精准的治疗，改善预后。 关键词:低分化肺癌;实性肺癌;免疫组织化学;表皮生长因子受体基因突变;间变性淋巴瘤激酶基因重排 第三部分用2015WHO的新标准诊断肺穿刺活检标本及相关肿瘤驱动基因的突变检测 目的应用2015版的WHO肺肿瘤分类对肺的小活检标本的诊断标准探讨肺穿刺活检标本的病理诊断及其表皮生长因子受体(EGFR)等主要肿瘤驱动基因的改变情况。 方法回顾分析北京医院过去3年(2015年7月-2018年7月)肺穿刺活检标本806例的临床资料、病理切片、免疫组化切片、特染切片，应用新版WHO肺肿瘤分类对其中483例肺癌标本的诊断标准重新分类，并且收集整理相关基因突变检测结果，总结分析。 结果过去3年穿刺活检为肺癌的病例数每年依次为58例、166例和259例次，一共483例。女性221例，男性262例;年龄37～85岁，中位年龄65岁。可分为:小细胞癌40例(8.28％);大细胞神经内分泌癌11例(2.28％);混合性神经内分泌癌3例(0.62％);不典型类癌2例(0.41％);腺癌208例(43.06％);非小细胞肺癌，倾向腺癌92例(19.05％);鳞癌66例(13.66％);非小细胞肺癌，倾向鳞癌42例(8.70％);非小细胞癌，非特指型16例(3.31％);非小细胞肺癌，提示腺鳞癌3例(0.62％)。检测202例的EGFR基因突变，有突变的107例(52.97％)。133例腺癌中，EGFR突变86例(64.66％);52例非小细胞肺癌，倾向腺癌中检出EGFR突变18例(34.62％)。27例EGFR的TKI靶向药物治疗后耐药的患者检测出22例T790M突变，354例非小细胞肺癌中免疫组织化学VentanaALK(D5F3)阳性3例，经EML4-ALK融合基因荧光PCR验证证实。38例检测了ROS1的病例有1例患者ROS1基因融合。1例伴有梭型细胞癌分化的非小细胞肺癌患者检测出MET基因14号外显子剪接突变。 结论应用2015版的WHO肺肿瘤分类对肺的小活检标本新的诊断标准可以更好地诊断肺穿刺活检标本，以期更精准的指导治疗，改善预后。
肺癌;表皮生长因子受体;间变性淋巴瘤激酶;免疫表型;分子亚型
中国医学科学院北京协和医学院
博士
肿瘤学（临床病理方向）
吕宁
2019
中文
R734.2
2020-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）