H9N2亚型禽流感病毒感染鹌鹑肺的转录组学研究
H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)属于低致病性AIV，可引起家禽、野鸟、人类等发生感染。鸟类感染H9N2亚型AIV，多呈隐性感染或者表现出轻微的临床症状，但是其消化道和呼吸道有不同程度的损伤。鹌鹑作为H9N2亚型AIV的一种宿主，不仅可以引发感染，而且还可以将病毒传播给其他鸟类、哺乳动物和人类。以往的研究表明，鹌鹑和鸡感染H9N2亚型AIV，鹌鹑表现出比鸡更高的易感性，肺表现出比鸡更严重的病理损伤。目前关于H9N2亚型AIV感染鸡的致病机制已经趋于完善，而关于H9N2亚型AIV感染鹌鹑的分子致病机制尚不明确。 本研究选用一株分离于湖北省荆门市活禽市场的H9N2亚型AIV（A/chicken/Jinmen/JM0305/2017），将病毒以107.0EID50/100μl的剂量滴鼻感染28日龄鹌鹑，通过组织病理学、免疫学和转录组学综合分析HgN2亚型AIV感染鹌鹑的分子致病机制及免疫应答机制，为鹌鹑禽流感的防控提供理论依据。研究结果如下: 1.H9N2亚型AIV感染鹌鹑的组织病理学分析 鹌鹑感染H9N2亚型AIV3天后，剖检所有鹌鹑，通过组织病理学和免疫组织化学技术进行分析，结果表明感染鹌鹑主要表现出肺出血、淤血、间质性肺炎，气管水肿、黏膜上皮细胞坏死脱落，肾小管上皮细胞坏死脱落，喉头轻微溃疡，肝细胞嗜酸性增强;IHC染色显示病毒主要分布于损伤部位及其附近，包括肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞，气管黏膜上皮细胞、纤毛和软骨细胞，肾小管上皮细胞。 2.H9N2亚型AIV感染鹌鹑肺的转录组学分析 转录组分析结果显示，感染组比较对照组共有288个差异表达基因（Differentially Expressed Genes，DEGs），包括212个上调基因和76个下调基因，其中包含32个免疫相关DEGs。免疫基因中包含23个上调基因和9个下调基因，上调基因中OASL（16.80倍）、CMPK2（11.79倍）、MX1(10.85倍)等基因均上调10倍以上，下调基因中ADCY8下调倍数最高（-4.89倍）。免疫相关DEGs中上调基因主要与Ⅰ型IFN调节和病毒复制的抑制等功能相关，MX1基因可以引发机体产生炎症反应以抑制病毒进入宿主细胞，这或许与感染鹌鹑肺出现炎症有关;感染鹌鹑主要通过Jak-STAT、RIG-like receptor、Toll-like receptor等信号通路的激活启动机体免疫反应而达到抗病毒的作用;同时，ADCY8下调，C1S、CMPK2上调可以抑制细胞能量代谢，从而抑制病毒的增殖。 综上所述，鹌鹑感染H9N2亚型AIV，虽不表现临床症状，但是可以导致轻度呼吸道损伤，MX1基因的上调可能参与了感染鹌鹑肺炎症的出现;感染鹌鹑主要通过启动先天免疫反应和抑制宿主细胞能量代谢抵抗病毒感染。本研究首次进行了H9N2亚型AIV感染鹌鹁肺的转录组学分析，将增加对鹌鹑感染H9N2亚型AIV的分子致病机制和免疫应答机制的了解，为后面疫苗和抗AIV药物的研究与开发提供新的靶点。
鹌鹑;H9N2亚型禽流感病毒感染;致病机制;疾病防控
华中农业大学
硕士
基础兽医学
程国富;温国元
2019
中文
S858.39;S855.3
2019-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）