朝鲜族大酱大豆异黄酮提取物对乳腺癌细胞凋亡作用研究
朝鲜族大酱是朝鲜族人们特别喜爱的一种传统美食，因其发酵后具有独特的风味，被越来越多的大众所接受，其发酵后不仅原有的风味会改变，里面的生物活性物质也随之发生变化。大酱中的主要成分为大豆异黄酮类物质，其具有抗氧化、抗肿瘤等多种功效，还有雌激素作用。乳腺癌为当今女性发病率和致死率较高的一种疾病，结合大豆异黄酮类物质的功效，对朝鲜族大酱大豆异黄酮提取物对乳腺癌细胞凋亡作用进行了初步研究。 为研究朝鲜族大酱发酵过程中主要活性成分的变化，以及其对乳腺癌细胞凋亡作用的影响，本试验选用实验室自制朝鲜族大酱，在不同发酵时期(O、1、3、6、9、12个月)进行取样，通过高效液相色谱法(HPLC)对其成分进行测定，选取最佳贮藏时期的朝鲜族大酱进行提取。通过CCK-8法测定朝鲜族大酱大豆异黄酮提取物(IEOKSP)对正常乳腺细胞、MCF-7乳腺癌细胞、MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的影响;通过划痕愈合实验，观察愈合程度;通过流式细胞术检测不同浓度的IEOKSP处理MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞后的细胞凋亡情况，以及周期变化。通过RT-PCR检测了caspase-3mRNA的表达情况，Western Blot法检测了凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Survivin、Caspase-3、cleaved-caspase-3的表达情况。最后通过Sea House细胞能量仪检测了通过IEOKSP处理后的MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞的能量代谢情况。 结果显示，朝鲜族大酱随着发酵的进行，贮藏时间的延长，其提取物中异黄酮组分有所变化，其中大豆苷元和染料木素随着贮藏时间的延长，含量逐渐升高，而大豆苷含量逐渐减少，三者总含量在贮藏三个月时达到最高;IEOKSP可抑制MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞的细胞活力，并呈现浓度-时间依赖性，能够有效地抑制细胞迁移，阻断细胞G1期进行阻滞，诱导细胞凋亡;IEOKSP能够提高MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞中caspase-3mRNA的表达，同时能够上调Bax，caspase-3，cleaved-caspase-3蛋白的表达，下调Bcl-2，survivin蛋白的表达从而引起细胞凋亡;IEOKSP能够通过线粒体途径降低乳腺癌细胞的耗氧率。 由此可以得出，朝鲜族大酱中主要抗癌成分随着贮藏时间的延长，含量逐渐增多，并且能够抑制乳腺癌细胞的增殖，降低其细胞代谢速率，阻断细胞周期，通过调控Bax，caspase-3，cleaved-caspase-3，Bcl-2，survivin相关凋亡蛋白的表达从而促进细胞凋亡，起到预防和辅助治疗乳腺癌的效果。说明IEOKSP对乳腺癌细胞的凋亡有一定的作用。
乳腺癌;朝鲜族大酱;大豆异黄酮提取物;细胞凋亡;调控机制
延边大学
硕士
作物学
崔承弼
2019
中文
R737.9;R979.1
2019-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）