放疗联合PD--L1单抗对小鼠结肠癌肿瘤微环境中IL--22表达的影响
目的: 放疗联合程序性死亡受体-配体1（Programmed death-ligand1，PD-L1）单抗不仅能协同增强机体抗肿瘤免疫反应，还可以改善肿瘤免疫微环境，从而产生远隔效应抑制远位肿瘤。白介素22（Interleukin-22，IL-22），一种主要由辅助性T细胞22(Th22)分泌的细胞因子，在多种恶性肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本研究将通过观察放疗联合PD-L1单抗的抗肿瘤作用及其远隔效应，同时检测细胞因子IL-22及CD8+T细胞在小鼠结肠癌肿瘤微环境中表达情况，探讨放疗联合PD-L1单抗抗肿瘤作用及其产生远隔效应的可能机制。 方法: 常规培养小鼠结肠癌肿瘤MC38细胞株，注射在C57BL/c小鼠的左侧后肢皮下作为第一位肿瘤，3天后小鼠的右侧后肢皮下注射同样数量的MC38细胞，作为第二位肿瘤，建立小鼠结肠肿瘤皮下移植瘤动物模型。第11天后将其随机分为4组（A:放疗组，B组:放疗联合PD-L1单抗组，C组:PD-L1单抗组，D组:空白对照组）。第12天A组和B组分别给予放疗3次（8Gy/次，1次/天），连续3天。第15天，B组和C组分别给予腹腔注射PD-L1单抗药物4次（200ug/次，1次/3天）。期间测量肿瘤体积，每隔3天测量一次。第35天荷瘤鼠颈椎脱臼法处死，取小鼠第二位肿瘤组织进行实验，通过免疫组化方法检测细胞因子IL-22及CD8+T细胞在小鼠结肠癌肿瘤微环境中表达水平。 结果: B组的荷瘤鼠第一位肿瘤明显缩小，甚至出现消失现象，而A组及C组的荷瘤小鼠第一位肿瘤均未明显缩小;B组的荷瘤鼠第二位肿瘤的生长速度比A组及C组的第二位肿瘤明显缓慢。通过免疫组织化学技术对荷瘤鼠的第二位肿瘤组织进行免疫组化染色结果显示B组的荷瘤鼠第二位肿瘤组织中细胞因子IL-22的表达水平比其它组的明显降低(A组:16610.15±2671.897，B组:13112.76±954.352，C组:17363.30±1889.805，D组:18595.93±3468.289);B组的荷瘤鼠第二位肿瘤组织中CD8+T细胞的含量比其它组的显著增多(A组:27529.05±2395.501，B组:37161.98±6665.989，C组:27473.89±3665.566,D组:24397.50±6163.696)。 结论: 放疗联合PD-L1单抗具有抗肿瘤作用，同时可诱发远隔效应。该效应的可能机制是通过减少肿瘤免疫微环境内IL-22表达，增加CD8+T细胞的含量，从而增强机体的抗肿瘤的作用。
结肠癌;放射治疗;PD-L1单抗;远隔效应;白细胞介素-22;蛋白表达
济南大学
硕士
肿瘤学
岳金波
2019
中文
R735.35;R730.5
2019-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）