化痰中药陈皮对血管平滑肌细胞糖胺聚糖病理代谢的研究
目的: 动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是危害人类健康的心血管疾病之一，位于血管壁中膜的平滑肌细胞的增殖和跨膜迁移，在动脉粥样硬化的发生发展进程中扮演着重要的角色。现代研究表明，中膜的平滑肌细胞的糖胺聚糖(Glycosaminoglycans、GAGs)病理性代谢与多种炎症因子的集聚有着重要的关系[1-3]。平滑肌细胞的糖胺聚糖病理代谢与中医的“痰证”有着密切的关系，且化痰方药治疗动脉粥样硬化的临床效果显著[4-6]。本研究采用氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein，ox_LDL)制作血管平滑肌细胞增殖模型，探讨化痰中药陈皮对血管平滑肌细胞糖胺聚糖病理代谢的影响。 方法: 采用ox_LDL制作血管平滑肌细胞增殖模型;通过硫酸咔唑法检测血管平滑肌细胞GAGs总量生成的变化;采用醋酸纤维膜电泳检测血管平滑细胞GAGs生成种类的变化;通过高效液相色谱法测定血管平滑肌细胞半乳糖胺生成总量的变化，观察陈皮对血管平滑肌细胞硫酸软骨素(Chondroitin sulfate、CS)生成总量的影响;使用流式细胞仪检测血管平滑肌细胞膜表面成纤维细胞生长因子-糖胺聚糖-成纤维细胞生长因子受体(bFGF-GAGs-FGFR1c)三元复合物荧光强度的变化，观察陈皮对血管平滑肌细胞膜GAGs结构和含量的影响;使用高通量测序检测血管平滑肌细胞GAGs转录组基因表达的变化。 结论: 1.陈皮对血管平滑肌细胞GAGs总量生成的影响。与空白对照组相比，模型组GAGs总量生成增多(P＜0.05);与模型组相比，陈皮100ug·ml-1组GAGs总量生成减少（P＜0.01）。 2.陈皮对血管平滑肌细胞GAGs种类生成的影响。与空白对照组相比，模型CS生成增多(P＜0.05);与模型组相比，陈皮100ug·ml-1组CS生成减少(P＜0.01)。 3.陈皮对血管平滑肌细胞半乳糖胺生成的影响。与空白对照组相比，模型组半乳糖胺(Galactosamine、Galac)生成增多(P＜0.05);与模型组相比，陈皮100ug·ml-1组半乳糖胺生成减少(P＜0.01)。 4.陈皮对血管平滑肌细胞bFGF-GAGs-FGFR1c三元复合物生成的影响。与空白对照组相比，模型组荧光信号增强(P＜0.05);与模型组相比，陈皮100ug·ml-1组荧光信号减弱(P＜0.01)。 5.陈皮对血管平滑肌细胞GAG转录组基因表达的影响。与空白对照组相比，硫酸软骨素蛋白聚糖5(Chondroitin sulfate proteoglycan5，Cspg5)每千个碱基的转录每百万映射读取的碎片(Fragments per kilobase of transcript per million fragments mapped，FPKM)值升高(P＜0.05);与模型组相比，陈皮100ug·ml-1组Cspg5FP KM值降低（P＜0.01）。 结论: 化痰中药陈皮可能通过降低血管平滑肌细胞硫酸软骨素的合成、减少bFGF-GAG s-FGFR1c三元复合物的生成、下调Cspg5的表达等方面调节糖胺聚糖代谢，从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。
动脉粥样硬化;化痰中药;陈皮;血管平滑肌细胞;糖胺聚糖;病理代谢
广州中医药大学
硕士
中医学
王剑
2018
中文
R543.5;R285
2019-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）