长链非编码RNA TMEM75在肝癌发生发展中的分子机制研究
目前已经发现许多在癌症发生发展中发挥重要作用的长链非编码RNA，所涉及的分子机制也是多种多样，而通过了解这些lncRNA参与癌症发生发展的具体分子机制对于癌症的治疗是非常必要的。本课题研究了一个新的lncRNA-TMEM75在肝细胞癌发生发展中所发挥的生物学功能，并试图揭示其参与肝细胞癌发生发展所涉及的分子机制。 通过Quantitative Real-time PCR技术检测TMEM75在肝癌患者的肿瘤以及相应的正常组织中的表达情况。台盼蓝染色细胞计数实验、划痕愈合实验、transwell实验分别用来检测细胞的增殖、迁移以及侵袭能力。裸鼠移植瘤模型用来模拟TMEM75对于体内肿瘤生长的影响。ChIP实验用来探究TMEM75对于PVT1启动子区组蛋白修饰的影响，RIP和RNA pulldown实验则用来检测TMEM75与MLL1和WDR5的相互作用。基因表达谱芯片分析用来寻找PVT1和TMEM75共同调控的下游基因。 笔者发现TMEM75在肝癌患者的肿瘤组织中的表达量要高于正常组织，这说明它在HCC中有可能是一个促癌基因。随后还发现TMEM75可以通过影响HCC细胞的细胞周期来影响细胞的增殖，并且它还会促进HCC细胞的侵袭能力，裸鼠移植瘤模型也说明TMEM75会促进体内肿瘤的生长。为了明确其促进HCC发生发展的分子机制，利用一系列分子生物学实验发现TMEM75可以通过招募MLL1和WDR5至PVT1的启动子区，并因此促进了PVT1启动子区附近的组蛋白H3K4发生甲基化的修饰，进而促进PVT1的表达。最后找到了一个TMEM75和PVT1共同调控的下游基因OGFR，它们可以通过抑制OGFR的表达来促进HCC细胞的增殖和侵袭能力。综上所述，发现了一个TMEM75-PVT1-OGFR调控轴在HCC发生发展中所起到的重要作用。
肝细胞癌;发病机制;长链非编码RNA;基因表达;细胞增殖;细胞侵袭
北京化工大学
硕士
化学工程与技术
袁其朋
2018
中文
R735.7;R730.231
126
2018-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）