来源于肠杆菌的巨大套索多肽的生物合成
在众多微生物天然药物中，核糖体多肽类药物(RiPPs)是重要的一类。RiPPs是由核糖体合成，经由翻译后修饰而得到的一大类天然产物，具有非常广泛的结构多样性和生物活性多样性。这些多肽类药物良好的抗菌活性及独特的作用机制引起了广泛关注，使这类化合物成为抗感染药物研究的一个热门的方向。在众多核糖体多肽类药物中，套索多肽相较于其它化学物，具有较为简单的修饰。然而其独特的“套索”状结构引起了众多关注。这种独特的三级结构给套索多肽类药物带来了独特的稳定性及抗菌活性。 本实验研究以肠杆菌为研究对象，挖掘探索新颖的套索多肽类抗生素。首先通过基因组挖掘的方法找到了来源于肠杆菌的套索多肽，通过结构预测，这种套索多肽有可能是世界上最大的一个套索多肽，总共由多达24个氨基酸组成。将这种巨大套索多肽的基因簇克隆到pET41上，并在大肠杆菌宿主中表达，经过质谱分析，成功得到可以产套索多肽化合物的重组菌，并确定最优发酵条件，在37℃下培养5h后诱导三天，套索多肽化合物的产量最高。 通过对巨大套索多肽基因簇的改造，在其基因簇中加入transporter片段，并插入核糖体结合位点，将改造后的基因簇克隆到pET41上，在大肠杆菌宿主中表达，通过液相检测，结果表明套索多肽化合物的产量提高了6倍左右。将改造后的重组菌大量发酵，并通过制备液相纯化，成功纯化出3mg套索多肽化合物。
抗感染药物;套索多肽;生物合成;抗菌活性
北京化工大学
硕士
药学
郑国钧
2018
中文
TQ465
90
2018-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）