蜜蜂慢性麻痹病毒在我国部分地区的发生与分布及吡虫啉对其增殖水平的影响
蜜蜂是维持农业平衡的授粉昆虫之一，具有重要的生态价值。然而，近年来发生的蜜蜂大量死亡事件，引起全球重视。一方面，环境中的化学农药残留会影响蜜蜂的生理和行为;另一方面，病毒作为主要病原体之一会在蜜蜂免疫力低下时趁机侵入并大量增殖，很可能是导致蜜蜂大量死亡的原因。许多研究证实农药或者病原体均可直接导致蜂群群势减弱，但是目前关于威胁蜜蜂健康的不同致病因子之间相互作用的研究还比较少，可能也是导致蜂群大量损失的原因之一。 本研究调查了蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus，CBPV)等8种常见病毒在10个省份中的流行情况;通过克隆和测序获得了CBPV北京株的全基因组序列，并获得GeneBank号，分别为KX168412和KX168413;通过RT-qPCR检测蜜蜂不同组织内的CBPV负义链表达情况;基于吡虫啉对意大利蜜蜂的毒力曲线初步研究了吡虫啉对CBPV含量的影响。 主要试验结果包括1、意蜂检测到除急性麻痹病毒(Acute bee paralysis virus，ABPV)外的7种常见病毒;中蜂检测到除ABPV、CBPV和瓦螨病毒(Varroa destructor virus-1，VDV-1)外的5种常见病毒。在意蜂中病毒检出省份占比最高的病毒是黑蜂王台病毒(Black queen cell virus，BQCV)和以色列急性蜜蜂麻痹病毒(Israeli acute bee paralysis virus，IAPV)，分别为100％和90％，其次是CBPV，为60％。在中蜂中病毒检出省份占比最高的是病毒是中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbroodvirus, CSBV)为80％。其次是IAPV和BQCV，都为70％。在意蜂中感染率最高的是BQCV，为64.64％，在中蜂中感染率最高的是IAPV，为48.89％。CBPV分布较广能够在河南、辽宁、北京、甘肃、青海和安徽6个省份意蜂样品中检测到，感染率为45.56％;未在中蜂中检测到CBPV。2、目前NCBI中关于CBPV中国株基因组序列信息较少，因此本研究通过克隆和测序获得CBPVRNA1和CBPV RNA2的基因组序列，补充了中国地区CBPV基因组序列信息。由RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase，RdRp)和预测结构蛋白(predicted structural protein，pSP)序列进化分析可知其与中国和日本的其他序列亲缘关系较近。3、使用荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)确定CBPV负义链的存在，证明CBPV能够在不同组织有效复制，尤其是头部和胸部，危害蜜蜂健康。4、通过吡虫啉检测试剂盒确定出现大量死亡蜂群的蜜蜂体内存在吡虫啉，含量在17μg/L-33μg/L之间，可能是导致蜜蜂死亡的原因。5、通过饲喂法获得吡虫啉对意大利蜜蜂的毒力回归方程为y=2.566x+2.839，计算得出LC25=0.816 mg/L，LC5=1.350 mg/L，LC10=2.027 mg/L。首先饲喂健康蜜蜂CBPV粗毒，之后再饲喂蜜蜂吡虫啉，定量蜜蜂体内CBPV含量。饲喂CBPV+LC5的吡虫啉组在48h时CBPV含量即显著高于对照组，72h时三个饲喂农药组蜜蜂CBPV含量都显著高于对照组，96h时LC10组显著高于其它组。结论:不同浓度吡虫啉会增加CBPV增殖水平，但是CBPV含量并不随时间和吡虫啉浓度不同有明显的变化趋势。从试验数据可以看出这两者之间相互作用的复杂性，但本研究仅是初步探索这两个因素之间的关系，未来还需要更深入研究探索。
意大利蜜蜂;慢性麻痹病毒;吡虫啉;病毒增殖
中国农业科学院
硕士
特种经济动物饲养
刁青云
2017
中文
S895.234
72
2018-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）