绿色木霉菌糠基质的研制及其在黄瓜根腐病防治中的应用
由茄病镰刀菌(Fusarium solani)侵染引起的黄瓜根腐病是一种常见土传病害。目前，木霉菌生物防治能有效控制黄瓜根腐病的发生，且不会引起环境污染，具有很大的发展潜力。本研究利用绿色木霉菌（Trichoderma viride）在菌糠废料中发酵制作成绿色木霉菌糠发酵物，并用于黄瓜根腐病的生物防治。利用荧光定量PCR(Real-time PCR，qPCR)检测技术，分析绿色木霉菌糠育苗基质在防病过程中病原菌及生防菌的动态变化。主要研究结果如下: 1.筛选出一株对茄病镰刀菌（F.solani）和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)具有较强抑制作用的绿色木霉菌Tr14。在平板对峙培养中，绿色木霉菌Tr14对茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌的抑制率分别为95.73％和82.97％，对峙系数为Ⅰ级，选择绿色木霉菌Tr14作为黄瓜根腐病的生防菌株。 2.明确了绿色木霉次级菌种发酵条件，建立了绿色木霉菌糠发酵物的制备。绿色木霉次级菌种制备最佳培养基为麦麸和玉米面质量比3∶1，最佳接种量为20％的浓度为1×108个孢子/mL绿色木霉菌悬液，最佳含水量为60％;30℃恒温条件下连续培养7d，产孢量达1×1010个孢子/g。将次级菌种按照1∶100体积比拌入菌糠废料中，30℃发酵15d即可实现绿色木霉菌糠发酵物的制备。 3.筛选出绿色木霉菌糠育苗基质的合适配方。当绿色木霉菌糠发酵物与草炭、蛭石以1∶1∶1的体积比混配时，对黄瓜根腐病防效为88％，对黄瓜幼苗促生作用最显著。绿色木霉菌糠混配基质的总孔隙度、氮解N、速效P、速效K的含量与绿色木霉菌糠发酵物所占比例呈正相关。 4.应用荧光定量PCR技术，揭示了绿色木霉菌糠育苗基质防治黄瓜根腐病过程中绿色木霉菌及茄病镰刀菌数量的动态变化。结果表明，绿色木霉菌数量在第1～7 d基本稳定，第8～30 d迅速上升而后维持在较高水平。茄病镰刀菌在第1～7 d基本不变，第8～45 d逐渐下降。绿色木霉菌在黄瓜根际的数量经历了由低到高的动态变化，说明随着黄瓜的生长，绿色木霉菌育苗基质中木霉菌的定殖数量迅速上升，与致病菌茄病镰刀菌互作抑制其繁殖，起到防病作用。 5.开发了绿色木霉菌糠发酵物防治黄瓜根腐病新技术。将绿色木霉菌糠发酵物与灭菌普通基质以体积比1∶10混匀，分别装入不同育苗钵中，测定绿色木霉菌糠发酵物防治黄瓜根腐病的效果。结果表明，绿色木霉菌糠发酵物与无纺布袋、纸钵或纸筒结合使用，对黄瓜根腐病的防效分别为88.35％、72.26％、75.92％，高于对照药剂70％甲基托布津可湿性粉剂80 mg/L的防效70.17％。无纺布袋防病技术与绿色木霉菌糠发酵物相结合，防效最高，可实现对黄瓜根腐病绿色、高效防治，值得在生产中进一步推广与应用。 本研究将农业生产中的废弃物与生防木霉菌相结合，既解决了菌糠带来的环境污染与资源浪费问题，又为我国黄瓜根腐病的防治提供了新思路、新技术。
黄瓜;根腐病;生物防治;绿色木霉菌;荧光定量PCR
中国农业科学院
硕士
植物病理学
李宝聚
2017
中文
S436.421
74
2018-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）