针刺对兔干眼模型眼表损害及泪腺细胞凋亡的影响
目的:通过皮下注射氢溴酸东莨菪碱注射液建立水液缺乏性兔干眼模型，探讨针刺对此模型眼表及泪腺细胞的影响，探索针刺对干眼的作用机制。 方法:健康新西兰白兔24只随机分为空白组、模型组、针刺组共3组，每组8只，空白组不作任何处理;模型组和针刺组皮下注射氢溴酸东莨菪碱，每日4次，每次2 mg·kg-1，直至实验结束;针刺组在干眼模型建立成功后进行针刺，每日针1次，共14天。不同时段观察各组的SchirmerⅠ试验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素钠染色(CFS)，光镜、电镜观察泪腺形态学变化，免疫组化检测泪腺组织中凋亡相关基因蛋白的表达，联酶免疫法检测泪腺组织中乙酰胆碱(ACh)的含量。 结果: 1.SIT:针刺第4、7、14天，针刺组与模型组相比，两组泪流量差异均有统计学意义(P＜0.05)。针刺第14天，针刺组与实验前相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。 2.BUT:针刺第7、14天，针刺组与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。针刺第14天，针刺组与实验前相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。 3.CFS:针刺第7、14天，针刺组与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05)。针刺组在针刺后的各时段与针刺前相比，差异显著(P＜0.05)，且在针刺第4天时，CFS评分最高，此后即呈现逐渐下降的趋势。 4.泪腺形态学观察:空白组的正常泪腺组织中未见明显细胞扩张及萎缩;模型组的泪腺上皮细胞萎缩，细胞内物质较少，可见大量淋巴细胞浸润;针刺组中泪腺柱状上皮细胞扩张，未见明显腺体萎缩，胞浆丰富，腺体间质少量淋巴细胞浸润。 5.泪腺组织凋亡相关基因蛋白的表达:空白组中偶见阳性细胞表达，模型组可见大量淡黄色至棕黄色细颗粒细胞，针刺组中见少量淡黄色至棕黄色细颗粒细胞;针刺组泪腺细胞凋亡因子相关基因蛋白Bax、Fas及FasL阳性表达的细胞数明显低于模型组，P＜0.05;针刺组的Bax/Bcl_2、Fas/FasL与空白组均无统计学差异，P＞0.05。 6.泪腺中Ach含量测定:针刺组泪腺组织中Ach含量较模型组高，差异显著，有统计学意义，P＜0.05;且针刺组与空白组相比时，差异均无统计学意义，P＞0.05。 结论: 1、皮下注射氢溴酸东莨菪碱可以成功制备兔干眼模型，且稳定持续。 2、光镜、电镜下观察模型组泪腺组织可见泪腺上皮细胞萎缩，细胞内物质较少，可见大量淋巴细胞浸润。针刺组的泪腺细胞胞浆丰富，排列紧密，活动良好，与空白组接近。 3、针刺对水液缺乏性兔干眼模型有良好干预作用，可以提高泪液分泌量，增加泪膜稳定性，改善角膜状况，其机制可能为通过促进Ach释放，抑制干眼兔泪腺组织的细胞凋亡和腺体萎缩，改善兔干眼模型的泪腺代谢，从而达到增加泪液分泌的作用。
针刺疗法;干眼;眼表损害;泪腺细胞
南京中医药大学
硕士
中医五官科学
高卫萍
2017
中文
R591.412;R245
46
2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）