mir-153和mir-520b对肿瘤细胞自噬的调控机制研究
自噬，又称Ⅱ型程序性细胞死亡，是细胞正常的生命活动之一，细胞在正常状态下会保持较低的自噬水平，以此来作为一种细胞生存生长的保护机制，但是当细胞受到来自内外某种特定刺激时，将发生异常自噬，microRNA作为一种非编码RNA，通过特异性结合靶基因的3’-UTR区域，抑制靶基因mRNA水平和翻译。然而，至今仍有大量自噬相关microRNA有待发掘。本课题发现了两种microRNA可以通过特异调控靶基因表达，影响肿瘤细胞自噬水平，进而影响细胞增殖、迁移、侵袭等生物学表型。 采用筛选加验证的方法，前期工作首先是通过实验筛选出两种理想的细胞模型，即确定研究的肿瘤细胞系，接着探索这两种细胞模型发生自噬的最佳诱导条件;筛选环节是将所有未发表过的microRNA进行筛选，在初步筛选出研究目标后，工作重点就是对筛选结果进行全方面多层面的验证。此外，还通过生物信息学的方法，对目标microRNA的靶基因进行预测，并采用实时定量PCR以及Western blot方法对预测结果进行验证，从而完善了该调控机制。 本研究首次发现，miR-153和miR-520b均可显著促进食管癌KYSE450细胞和乳腺癌MCF-7细胞自噬;其中miR-520b是与癌基因CDCA7靶向结合使其沉默，且生物信息学提示，CDCA7与自噬相关基因CASP2互为ceRNA，CASP2可以通过竞争性结合miR-520b来调节CDCA7的表达。文献报道，自噬相关基因CASP2的消耗会引起细胞自噬水平升高;故高表达miR-520b可以促进细胞自噬。与此同时，体外细胞功能实验结果表明，miR-153和miR-520b可以显著抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。总而言之，这些结果表明miR-153和miR-520b是一种肿瘤生物治疗的潜在靶分子。
肿瘤免疫学;细胞自噬;miR--153基因;miR--520b基因;调节机制
北京化工大学
硕士
药学
杨明
2016
中文
R730.3
83
2017-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）