人肝微粒体中CYP1A2,CYP2E1,CYP2C9活性检测及四种中药注射剂对其影响的研究
目的:考察中药注射剂曲克芦丁脑蛋白水解物注射液、大株红景天注射液、注射用红花黄色素和注射用血塞通（冻干）对人肝微粒体中三种酶CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9活性的影响。 方法:①选择非那西丁、双氯芬酸和氯唑沙宗分别作为CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1的探针药物，建立体外肝微粒体孵育体系。用HPLC法测定各个探针药物的代谢产物对乙酰氨基酚、4-羟基双氯芬酸和6-羟基氯唑沙宗的生成量的影响，计算出各自Vmax和Km，考察酶活性变化。②分别将不同体积百分浓度的曲克芦丁脑蛋白水解物注射液和大株红景天注射液，以及不同浓度的注射用红花黄色素和注射用血塞通（冻干）加入到人肝微粒体孵育体系中，再次测得各探针药物的代谢产物生成量，求得半数抑制浓度(IC50)。 结果:①非那西丁、双氯芬酸和氯唑沙宗及其各自内标和代谢产物峰型光滑对称，分离良好。对乙酰氨基酚、6-羟基氯唑沙宗和4-羟基双氯芬酸线性范围分别为1.00～50.0μmol·L-1、0.50～30.0μmol·L-1和0.50～30.0μmol·L-1。日内精密度和日间精密度都低于10％，准确度都在85％～115％内。处理回收率都高于85％，稳定性都低于5％。②酶动力学考察:非那西丁的酶动力学参数Km为93.0μmol·L-1，Vmax为0.99 nmol·min-1·mg protein-1;双氯芬酸的酶动力学参数Km为18.2μmol·L-1，Vmax为1.42 nmol·min-1·mg protein-1，氯唑沙宗的酶动力学参数Km为45.7μmol·L-1，Vmax为0.65 nmol·min-1·mg protein-1。③IC50:大株红景天注射液对CYP1A2和CYP2C9有抑制作用，IC50分别为10.8％和75.5％，对CYP2E1无明显抑制。曲克芦丁脑蛋白水解物注射液对CYP2E1有抑制作用，IC50为33.4％，而对CYP1A2和CYP2C9无明显抑制。注射用红花黄色素对CYP2C9有抑制作用，IC50为574.6μg·ml-1，对CYP1A2和CYP2E1无明显抑制作用;注射用血塞通（冻干）对CYP1A2和CYP2C9有抑制作用，IC50分别为68.6μg·ml-1和9.00μg·ml-1，对CYP2E1无明显抑制作用。 结论:从实验结果可以看出，在临床常用治疗浓度下，只有注射用血塞通（冻干）对CYP1A2和CYP2C9有抑制作用，对CYP2E1无影响;其他三种药物在临床治疗浓度下对CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9无影响。
肝微粒体;CYP酶;中药注射剂;药理活性
大连医科大学
硕士
药理学
汤新强
2016
中文
R285
48
2017-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）