红景天苷激活PI3K/Akt/Nrf2信号通路对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用
目的: (1)研究红景天苷对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用;(2)研究抑制PI3K/Akt/Nrf2信号通路对红景天苷神经保护作用的影响，从分子生物学水平阐明红景天苷神经保护作用的部分机理。 方法: (1)健康成年的雄性SD大鼠60只，随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)和红景天苷给药组(MCAO+Sal)，制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，再灌注1h后腹腔注射红景天苷（50 mg/kg）或生理盐水，连续给药6天。免疫荧光法检测大鼠脑组织TUNEL阳性细胞的表达情况，Real-Time qPCR检测NogoA、NgR的mRNA表达，Western Blot法检测Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、BDNF、NGF、NogoA、NgR、Nrf2和HO-1的蛋白表达。 (2)健康成年的雄性SD大鼠50只，随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、红景天苷给药组(MCAO+Sal)、PI3K抑制模型组(MCAO+LY294002)和P13K抑制给药组(MCAO+LY294002+Sal)。在脑立体定位仪的引导下，向大鼠左侧侧脑室局部注射PI3K抑制剂(LY294002)或含25％ DMSO的PBS溶液，30 min后制备MCAO模型，MCAO模型大鼠再灌注1h后腹腔注射红景天苷(50mg/kg)或生理盐水。24 h后取材，Real-TimeqPCR检测TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达，Western Blot法检测p-IκBα、IκBα、p65、p-Akt、Akt、Nrf2、HO-1、Bcl-xl和Bax的蛋白表达。 结果: (1)红景天苷能够减少MCAO大鼠脑组织细胞凋亡，促进MCAO大鼠Bcl-2、BDNF和NGF的蛋白表达，抑制MCAO大鼠Cleaved Caspase-3的蛋白表达，降低MCAO大鼠NogoA和NgR的mRNA和蛋白表达;同时，红景天苷可促进MCAO大鼠脑组织Nrf2和HO-1的蛋白表达; (2)红景天苷能够降低MCAO大鼠脑组织p-Iκ Bα的蛋白表达和p65的核转录水平;红景天苷促进了MCAO大鼠脑组织p-Akt、Nrf2和HO-1的蛋白表达并会被LY294002逆转;红景天苷降低了MCAO大鼠脑组织TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达并被LY294002逆转;红景天苷促进Bcl-xl的蛋白表达并抑制Bax的蛋白表达，二者都会被LY294002逆转。 结论: 红景天苷可减少MCAO大鼠脑组织细胞凋亡，促进神经营养因子表达和突触生长，减弱促炎细胞因子分泌，具有神经保护作用。其神经保护作用的分子机制可能与激活PI3K/Ak/Nrf2通路有关。
局灶性脑缺血;红景天苷;神经保护;实验药理
福建中医药大学
硕士
药理学
洪桂祝
2016
中文
R743.3;R285.5
63
2016-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）