核受体Nur77和RXRα新型小分子调节剂的优化设计和活性研究
核受体是一类重要的转录因子超家族，参与了许多生理和病理过程的调控。本文主要针对核受体Nur77和RXRα的小分子调节剂进行活性筛选和功能研究。 第一部分主要研究靶向Nur77的双吲哚类化合物。Nur77是孤儿核受体的一员，目前尚未发现其内源性配体。但随着研究的不断深入，已有一些Nur77的体外配体被报道。有文献报道，双吲哚类化合物DIM-C-pPhCF3可以激活Nur77的转录活性和诱导细胞凋亡。因此，我们对DIM-C-pPhCF3的双吲哚环进行修饰，同时以形成磺酸盐的形式使其氧化，得到一系列全新的衍生物。在我们的研究中发现，氧化后的化合物相对于其氧化前对于癌细胞的增殖抑制大大增强，其中氧化得到的化合物XS-0170、0134、0135、0139能有效诱导细胞凋亡。Nur77在细胞核外与Bcl-2相互作用是其诱导凋亡的一条有效途径。我们发现这4个化合物能诱导Nur77出核及Nur77-LBD与Bcl-2共定位。另外，与许多靶向Nur77-Bcl-2通路诱导凋亡的化合物不同，这4个化合物并不诱导Nur77的表达量增加，而且能通过Nur77激活Nur77与RXRα异源二聚体的转录活性，其诱导细胞凋亡的效应还具有Nur77依赖性。其中，在双吲哚环上5位进行氟取代得到的化合物XS-0134相对于母核具有更高的靶向性。通过对这系列化合物的研究，为后续设计更加特异地结合Nur77的小分子调节剂奠定了基础。 第二部分是针对靶向RXRα辅助激活因子结合位点的拮抗剂的研究。近期我们课题组报道了化合物23结合于RXRα表面的辅助调节因子结合位点，开启了靶向RXRα表面结合位点的药物开发的先例。为进一步表征23的结合特性，我们采用了分子对接软件模拟23与RXRα的结合模式，其显示23香豆素环上的羟基以氢键与RXRα上453位的谷氨酸相互作用。为验证这一猜测，我们将这一羟基进行甲基化，结果表明甲基化后的化合物对于9-cis-RA诱导的转录激活作用明显减弱，说明这一羟基对于其结合的重要性，这一结论也在23的衍生物上得到确证。另外我们发现，化合物23的衍生物XS-0053，相对于23有更强的抑制RXRα激活的作用，而且能抑制TNFα激活的NF-κB信号通路，包括抑制IKK活化，IκBα降解和p65的入核。进一步研究表明XS-0053可以抑制tRXRα与TRAF2的相互作用，说明XS-0053抑制NF-κB信号通路是以通过RXRα实现的。这一部分的研究对于进一步开发结合于RXRα表面的调节剂具有重要意义。
小分子调节剂;核受体;优化设计;转录活性;神经生长因子诱导基因B
厦门大学
硕士
药理学
张晓坤
2016
中文
R966
72
2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）