油酰乙醇胺抗炎及神经血管修复的作用研究
研究背景:油酰乙醇胺(OEA)是一种天然存在于组织和循环血液中的脂肪酸乙醇胺类化合物，研究发现OEA具有调节饮食及葡萄糖稳态、影响脂质代谢、抗动脉粥样硬化和神经保护等多种生物学作用。其中动脉粥样硬化发生发展过程是一种炎症反应过程，我们研究发现OEA可以通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)，抑制Toll样受体4(TLR4)的表达，从而减轻细菌脂多糖(LPS)诱导的人急性白血病单核细胞(THP-1)的炎症反应。但是OEA具体的抗炎机制尚不清楚。另脑卒中是一种神经功能缺损的常见脑血管疾病，我们研究发现OEA可促进大鼠缺血性脑卒中慢性期海马的神经发生，改善大鼠脑缺血后的认知功能，发挥神经保护作用。而OEA是否对脑缺血后皮层区有神经保护作用尚不清楚，因此本论文对此展开了研究。 研究目的: 1.探究在LPS诱导的THP-1细胞中OEA具体的抗炎机制。 2.探究OEA对大鼠脑卒中后损伤侧皮层区神经血管的保护作用。 研究方法: 1.通过Western Blot以及荧光定量PCR方法，检测LPS诱导的THP-1细胞中，TLR4下游信号通路NF-κB以及MAPK信号通路中的相关蛋白表达，探究OEA的抗炎机制。 2.通过大脑中动脉阻断法(MCAO)，建立大鼠右侧短暂局灶性脑缺血模型，选用成年雄性SD大鼠(250-280 g)，随机分为Sham组、Model组、O10(OEA-10mg/kg)组、O30(OEA-30mg/kg)组。分别于术后7天，14天，21天，28天以及35天检测大鼠各组抓力指标，用于评价大鼠术后各组的神经功能。利用免疫荧光双标技术于缺血后21天检测BrdU+/Lamin+细胞，缺血后35天检测BrdU+/NeuN+以及BrdU+/GFAP+细胞。缺血后35天尼氏小体染色检测缺血核心区面积。Western Blot检测缺血后21天DCX、VEGF、SDF-1α/CXCR4，缺血后35天GAP-43/SYN、NGF/NT3/BDNF、Wnt3a/p-β-catenin/β-catenin、p-CREB/t-CREB蛋白表达的变化。 实验结果: 1.OEA抑制了LPS诱导的THP-1细胞中NF-κB的激活、ERK1/2和STAT3的磷酸化以及AP-1的表达。在加入ERK1/2阻断剂后，OEA对ERK1/2以及STAT3磷酸化的抑制作用减弱，同时对AP-1以及IL-6表达的抑制作用也降低。 2.OEA可以在缺血后不同时间点明显改善大鼠脑缺血后的运动功能，并且可以增加缺血半暗带新生神经元以及新生血管细胞的数量，提高VEGF/SDF-1 a/CXCR4、 DCX、 GAP-43/SYN、 BDNF/NGF/NT3、Wnt3 a/p-β-catenin/β-catenin以及p-CREB/t-CREB的表达。 实验结论: 1.在LPS诱导的THP-1细胞中，OEA是通过抑制TLR4下游的NF-κB以及ERK1/2/AP-1/STAT3信号通路发挥抗炎作用。 2.OEA可以通过促进脑卒中后皮层区缺血半暗带的神经血管网络重构，来改善脑缺血后的神经功能。
油酰乙醇胺;人急性白血病单核细胞;抗炎机制;脑卒中;神经血管;修复作用
厦门大学
硕士
药理学
金鑫;杨立朝
2016
中文
R965
74
2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）