A54修饰葡聚糖-PLGA嫁接物胶束的靶向递药研究
特异性递送化疗药物及磁共振成像对比剂进入肿瘤细胞是高效肿瘤靶向治疗和磁共振成像需要解决的问题之一。 本研究在具有肿瘤组织被动靶向功能的葡聚糖-聚（乳酸-羟基乙酸）嫁接物(Dex-PLGA)胶束的研究基础上，设计并合成了经噬菌体展示技术筛选得到的主动靶向多肽A54(AGKGTPSLETTP)修饰葡聚糖-聚（乳酸-羟基乙酸）嫁接物(A54-Dex-PLGA)胶束。制备得到的A54-Dex-PLGA嫁接物胶束具有较低的临界胶束浓度(22.51μg mL-1)和较小的粒径（50 nm左右），并且可以有效包载抗肿瘤药物阿霉素（包封率高于75％），其体外药物释放可持续72 h。A54-Dex-PLGA嫁接物胶束对两种肝癌细胞系（BEL-7402和HepG2细胞系）同时表现出了较强的内在化能力，但在BEL-7402肝癌细胞的内在化能力要强于对HepG2肝癌细胞。体外肿瘤细胞毒性实验证明了A54-Dex-PLGA嫁接物的低细胞毒性和载阿霉素嫁接物胶束对肝癌细胞BEL-7402的有效抑制作用。荷瘤模型动物体内分布实验结果进一步证明载阿霉素嫁接物胶束在肝癌BEL-7402组织中的蓄积显著强于HepG2肝癌组织。 合成得到的A54-Dex-PLGA嫁接物胶束载体可同时包载超顺磁性氧化铁纳米粒(SPIO)作为MR成像对比剂。共载超顺磁性氧化铁纳米粒后，对阿霉素的包封率及嫁接物胶束对阿霉素的载药量均无显著变化，药物包封率在80％左右，载药量在3.8％左右。阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束拥有小于100 nm的粒径，外加磁场法研究结果表明磁性纳米粒被成功包裹入胶束，且具有良好的分散性。阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束的体外释放实验结果表明，A54的修饰以及超顺磁性纳米粒的包载对嫁接物胶束的药物释放无显著影响。细胞共孵育体系的竞争性摄取实验结果表明A54修饰阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束能够特异性地被BEL-7402细胞所摄取。MTT法和活细胞染色法实验结果显示了经靶向多肽A54修饰后的阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束的抗肿瘤药效(IC50约为0.56μg/mL)明显强于非A54修饰阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束（IC50约为1.24μg/mL）。体外细胞MR成像结果同样证明阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束能够特异性结合肝癌细胞BEL-7402;采用BEL-7402裸鼠原位移植肝癌模型进行体内MR成像实验，进一步验证阿霉素和磁性纳米粒共载嫁接物胶束的体内靶向效果。模型动物的抗肿瘤药效学研究表明，A54-Dex-PLGA/DOX/SPIO胶束能有效地抑制肿瘤的生长，相比于市售盐酸阿霉素注射剂，能显著降低药物的毒副作用。本研究结果表明，A54-Dex-PLGA嫁接物胶束通过A54靶向多肽的介导，能够显著提高抗肿瘤药物的肿瘤组织靶向性，实现BEL-7402肝癌细胞的特异性摄取，可在提高药物抗肿瘤疗效的同时降低其毒性，同时能够包载SPIO作为MRI对比剂，在肝癌靶向磁共振分子成像中具有良好的应用前景，成功构建了集诊断和治疗于一体的多功能嫁接物胶束递药系统A54-Dex-PLGA/DOX/SPIO。
恶性肿瘤;靶向递药;化疗药物;磁共振成像;MRI对比剂;靶向多肽A54;聚合物胶束
浙江大学
硕士
药剂学
杜永忠
2016
中文
R979.1;R981;R943
106
2016-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）