黄瓜果实RFOs降解部位及其与酸、碱性α-半乳糖苷酶关系的研究
与大多数高等植物不同，黄瓜(Cucumis sativus L.)是以棉籽糖家族寡糖类(Raffinosefamily oligosaccharides，RFOs)作为光合产物的主要运输形式（主要是水苏糖和棉籽糖）。水苏糖经过长距离运输到达果实后，在果实哪个部位分解尚不明确，一种观点认为RFOs在果柄分解成蔗糖等，再运输至果实;另一种观点认为RFOs可以通过果柄运输到果实，在果实中快速分解。水苏糖在分解过程中，α-半乳糖苷酶起到重要的作用，而6种α-半乳糖苷酶（三种碱性形式和三种酸性形式）中哪一类或哪一种对分解水苏糖起主要作用，尚没有统一观点。为此，本研究以黄瓜果柄、果实和甜瓜果柄为实验材料，对韧皮部汁液进行可溶性糖含量的测定。同时，还以黄瓜果柄、果实前端和去除黄瓜第二果实后，第一果实果柄为实验材料，对可溶性糖含量和6种α-半乳糖苷酶基因表达水平、活性进行比较。推测碱性α-半乳糖苷酶主要负责水苏糖水解之后，使用特殊化学诱导表达载体pX6/pX7进行黄瓜两种碱性α半乳糖苷酶RNAi载体的构建，将用于后期黄瓜转基因研究。所得结果如下: 1、黄瓜果柄、果实都是水苏糖和棉籽糖分解的场所，分解持续进行。从黄瓜果柄至果实，韧皮部汁液中水苏糖和棉籽糖的含量逐渐降低，到达果实末端含量最低，蔗糖、果糖和葡萄糖的含量逐渐升高。各种可溶性糖含量从果柄至果实一直存在变化，但变化比较缓慢。 2、黄瓜果实水苏糖卸载中碱性α-半乳糖苷酶起主要作用。对黄瓜果柄和果实前端分段取样，将6种α-半乳糖苷酶基因表达水平、活性与可溶性糖含量相比较，结果显示水苏糖和棉籽糖的含量与碱性α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性变化趋势相反，而与酸性α-半乳糖苷酶无明显的关系。去除第二果实后，对第一果实果柄汁液和组织中可溶性糖含量，以及果柄组织6种α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性的研究表明，碱性α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性与棉籽糖和水苏糖上升幅度一致，而酸性α-半乳糖苷酶没有表现出相应的变化趋势。 3、甜瓜果柄存在水苏糖的分解。甜瓜果柄汁液中，棉籽糖和水苏糖含量从茎端到果端逐渐降低，蔗糖、葡萄糖和果糖表现出逐渐升高。 4、成功构建碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ和Ⅱ RNAi载体。使用特殊化学诱导表达载体pX6/pX7进行α-半乳糖苷酶Ⅰ和Ⅱ RNAi载体构建，通过电泳检测和测序比对，确定两种RNAi载体构建成功，可用于后期黄瓜转基因研究。
黄瓜果实;棉籽糖家族寡糖类;降解部位;α-半乳糖苷酶
扬州大学
硕士
蔬菜学
缪旻珉
2014
中文
S642.2;S601
70
2016-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）